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抗体の選び方でなやんでます!!! トピック削除
No.4986-TOPIC - 2016/04/12 (火) 18:10:17 - Ryota
実験をはじめてまもない初心者です。
最近、がんのMETの発現の研究をしているのですが抗体の選び方に悩んでいます。
調べるとSanta Cruz社に2つ(C-12, C-28)。Cell signaling(#4560)に1つあります。論文を調べるとともに使われていてどの抗体が一番反応がいいかわかりません。
そこでMET抗体を買うときどこが決め手になるのでしょうか?
また以前METの抗体を購入したことがある人がいたからよい抗体をおしえてください。

初心者なので困ってます。
 
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No.4986-10 - 2016/04/14 (木) 23:01:02 - 節約乙
支出を抑えたいならばサンプルサイズを用意してる会社もあるので見てみたらどよ。てかそのサイズで十分に足りてしまうことは多い。10000円〜20000円の範囲で買える。あといろんな会社がキャンペーンとかしててかなり安くなる事あるし、モニターで無償提供とかもあるのでからそういう情報はマメにチェックしたほうがいい。

抗体はどこのがいいというのは一概にいえないけど、学会とかでポスターとか見ながら、あそこのはアレだとか、特異性があやしいだとか, 免疫染色はいいけどウェスタンはいまいちだとか、みたいな論文など公のまじめな文書にはけっして書かれることのない口コミ情報を収集するのはいいかもしれない。論文をもとにするのもいいとはおもうけど、正直いうと、みなさん、いいところだけを見せたがるので、あまりあてにならないかもしれない。

ありがとうございます。 削除/引用
No.4986-9 - 2016/04/13 (水) 15:23:29 - Ryota
やはり難しい選択なのですね。皆様の意見を参考にして選ばせていただきます。
すぐにお返事いただき助かりました、ありがとうございます。
頑張ります。

(無題) 削除/引用
No.4986-8 - 2016/04/13 (水) 08:56:53 - abb
いろんな会社から抗体が出ているけど、全部とは言わなくても複数の抗体を試している人なんてそんなにいないから、どこの抗体がいいなんて言えるのは、よっぽど金持ちか、マイナーな抗原を検出している人か、そこの会社の関係者くらいでしょうね。
それぞれのラボで好みも有るわけだし、まずはラボの上の人に聞いてみる。
任せた、と言われたら論文でよく使われていて結果も良好そうなものを選ぶ。
たぶん、いまこの状態で3つに絞ったのだと思うけど、あとは予算がどのくらいあるかとか、会社自体の信頼性で選べばよい。
CSTの方が個人的には信頼しているけど、実績があるならSantaCruzの方が量が多いのでコストパフォーマンスは良好。
あと、Metに関してはCSTならRabbit Monoclonalがあるのでそっちを選ぶかな。
高い買物なので慎重になるのはよいことだけど、上の人に最終確認はして下さいね。

(無題) 削除/引用
No.4986-7 - 2016/04/13 (水) 08:35:12 - おお
会社で選べと言われれば、Cell signalingに一票です。理由はあまり変なことは言いたくないので、好みということにしておきます。

(無題) 削除/引用
No.4986-6 - 2016/04/13 (水) 08:26:07 - しろ
>[Re:1] Ryotaさんは書きました :
> 調べるとSanta Cruz社に2つ(C-12, C-28)。Cell signaling(#4560)に1つあります。

もっとありますね。私は抗体を選ぶ場合はそれぞれの会社が例に上げている写真がクリアーに出ているかどうか、そのサンプルの中に自分が使いたい細胞があればなおよい、あとはその抗体を他の研究室でも使っているか、などで判断します。あとは何に使えるか、とかアイソタイプの動物種によるとか・・・・あまり多くの抗体量を使わないようでしたら、Cell signalingやAbcamに小さいサイズが売っています。


論文を調べるとともに使われていてどの抗体が一番反応がいいかわかりません。

ともにいい抗体、ということですね。だったら安いほうを買うかな・・・

(無題) 削除/引用
No.4986-5 - 2016/04/13 (水) 08:25:04 - おお
たとえばあなたが何かの刺激で発現が上がるとか、いろいろな比較で発現しない物があるとかそういったことを見るとして、そういう場合すでに発表されている同様の実験で使っている抗体を使うのが、一番保守的だけど筋が通っていると思います。

色々と抗体があるでしょうけど、ペプチドから作った抗体は結構多いですが、その場合はその部分のエピトープを持つものしか検出してないことになります。またそのペチチド配列の部分が修飾されたなら反応しなくなる可能性があります。これはあくまでも検出されないものがある可能性であって実際に起こるか見極めるのが難しい場合がほとんどでしょう。要するに抗体次第でアウトプットが違う可能性があり、それは実際議論がされている場合もまあまああります。

あとヒトで検出するとして、マウスで検出する可能性はどうなのか、使用用途としてWBだけを考えているのか、そうでなければその他のアプリケーション用(免疫染色とかIPとかフローサイトとか)にそれぞれ違う抗体を買うのかなども予め考えておいたほうがいいでしょう。

(無題) 削除/引用
No.4986-4 - 2016/04/13 (水) 07:47:55 - まっくろん
メーカーの2択だと、うちではCSTかなー。グーグルスカラーなんかで、それぞれどれぐらい使われてるか調べるといいと思います。

(無題) 削除/引用
No.4986-3 - 2016/04/13 (水) 07:28:48 - IF
抗体選びは「運」です.が,一応,抗体のデータシートにブロッティングの写真がある,ポジティブコントロールがはっきりしている,など参考に購入しています.データシートはWebで確認できますよ.

(無題) 削除/引用
No.4986-2 - 2016/04/13 (水) 06:27:13 - おお
回答するのになやんでます。。。

抗体の選び方でなやんでます!!! 削除/引用
No.4986-1 - 2016/04/12 (火) 18:10:17 - Ryota
実験をはじめてまもない初心者です。
最近、がんのMETの発現の研究をしているのですが抗体の選び方に悩んでいます。
調べるとSanta Cruz社に2つ(C-12, C-28)。Cell signaling(#4560)に1つあります。論文を調べるとともに使われていてどの抗体が一番反応がいいかわかりません。
そこでMET抗体を買うときどこが決め手になるのでしょうか?
また以前METの抗体を購入したことがある人がいたからよい抗体をおしえてください。

初心者なので困ってます。

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