初代培養ヒト細胞にレトロウイルスベクターを用いて
外来遺伝子を発現させることを計画しています。
異分野のことをやっているため初歩的なレベルで分からないことがあり
どなたか教えて下さると助かります。
質問１
パッケージング細胞を用いて作製されたウイルスベクターには
gagやpolなどのウイルス遺伝子が含まれていないのに、
なぜ逆転写されてウイルスDNAが宿主DNAにインテグレートされるのでしょうか？
質問２
ウイルスベクターにより導入された外来遺伝子が宿主細胞の染色体上の
どこに組み込まれた明らかにすることはこの分野の研究の流儀として
行うべきなのでしょうか？実験目的にもよるとは思いますが。
そもそもベクターが感染した個々の細胞ごとに組み込まれる場所も異なるのか、
それともベクターのLTR配列によりその場所は特異的に決まっているのか。
といったところなのですが、他にもアドバイスなど頂ければ幸いです。
よろしくお願いします。 |
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