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(無題) 削除/引用 No.4943-7 - 2016/03/29 (火) 04:32:56 - CD HLA-A2とA24はMBLから抗体が手に入るみたいですね。日本人の７５％がこのホモあるいはヘテロだということなので2つ抗体買っておけばなんとかなりそうな気もします。ただやっぱりジェノタイプが結構な手間ですよね。 Immunologistとのことだったので勝手に末血を使うのかと思い込みましたが、組織サンプルだと結構大変ですよ。もう一度くださいは普通ありえないし、凍結保存で見たいものが変わるようだと困りますしね。

(無題) 削除/引用 No.4943-6 - 2016/03/29 (火) 00:02:00 - CD HLAうまくいきますかねえ？ ドナーのPBMC貰って、ジェノタイプして、それから抗体を買って、染めて、共培養と言うステップになるわけですよね。 日本人に多いサブタイプが2つか3つしか無いHLAがあればよいですが。その辺り調べられると良いと思います。 というか、そもそもHLAサブタイプを染め分けられる抗体ってコマーシャルに手に入るんですかね？ 活発に分裂するならレトロでも入りそうな感じですがダメなんですか？

(無題) 削除/引用 No.4943-5 - 2016/03/28 (月) 22:51:21 - mouse+immunologist 皆様、コメントありがとうございます。お礼が遅くなり失礼しました。 GFP様 このPrimary細胞は遺伝子導入がレンチを使っても難しいので、できれば抗体ベースが良いと考えていました。 Mon様 CFSE-likeなdyeも考えたのですが、この細胞は活発に分裂するため長時間の共培養には不向きなようでした。 たていす様 もしご存知でしたら使いやすい抗体のクローンなどをお教え願えないでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.4943-4 - 2016/03/25 (金) 15:31:10 - たていす 血液型やHLA型でOKなような気がします。

(無題) 削除/引用 No.4943-3 - 2016/03/25 (金) 15:07:43 - mon 脂質を標識する試薬もあります。使ったことはないのでご紹介だけ。。。 https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/SAJ/Brochure/1/saj1600.pdf

(無題) 削除/引用 No.4943-2 - 2016/03/25 (金) 06:42:32 - GFP 私なら抗体染色でなく蛍光タンパク質入れて識別します

個体識別用のマーカー；ヒト細胞co-culture実験 削除/引用 No.4943-1 - 2016/03/24 (木) 04:28:25 - mouse immunologist いつもお世話になっております。 トピックにあるように、異なるドナーからのprimary細胞を使って共培養の実験を計画しています。 培養後にどちらのドナー由来の細胞かをFACSの上で識別した上でphenotypeを見たいと考えているのですが、このような用途に有用なマーカーと抗体を教えていただけないでしょうか。 マウスではCD45.1, CD45,2の抗体がよくワークしますが、ヒトでの実験の経験が限られているため、お教え願えましたら幸いです。

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