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(無題) 削除/引用 No.4937-2 - 2016/03/24 (木) 23:37:55 - １２３４５６７８ クライオスタットの庫内温度が高いのだとおもう。室温との関係で-20±1~3℃くらいで適宜かえていい感じにところ探ったらどうかな。わずか1~2C違っても切れ方結構ちがうよ。

凍結切片のカーリング 削除/引用 No.4937-1 - 2016/03/22 (火) 18:15:29 - 切片 当方、還流固定したマウス脳組織を用いて凍結切片を作製することが多々あります。 その際に凍結脳がカーリングすることがあるのですが、この原因がどういったものがはっきりしません。 具体的な手順としては以下の通りになります。 ↓還流固定後の脳組織を1晩PFAで後固定 ↓10-20%スクロースで脱水 ↓液体窒素で冷やしたヘキサンにOCTに漬けた脳組織を入れて凍結 ↓クライオ（庫内-20℃）で厚さ30um切片作製 ↓PBSに漬けると切片が時々カーリング といった具合です。 凍結の際にはヘキサンでなく、OCTに漬けた状態で-70℃の冷凍庫に入れることもありますが、その方がカーリングが少ない気もします。 皆様は具体的にどのように凍結切片を作製されていていますでしょうか。また、カーリングの要因となる箇所があるようでしたらご指摘いただけないでしょうか。

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