Bio Technical フォーラム

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10 mM dNTP内に結晶?粉? トピック削除
No.4924-TOPIC - 2016/03/17 (木) 16:10:31 - なぞあ
実験初めて間もないものですが、PCRでdNTPがなくなったので注文すべきか上の人に聞いたら、dATP, dTTP, dGTP, dCTPの古い単品があるもんでそれを均等に混ぜたら?と言われました。各100 mMでした。

なので1:1:1:1で混ぜて25 mMを作ったのち、1.5倍量の水を加えて10 mMにしたらいいのかなと思ってますが、-20度保存の各チューブを見ると中身が当然凍っているのですが、一部チューブの壁面に粉末が出ていたりなど奇妙でした。

これは単純に凝固点降下によって説明できますか?
 
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(無題) 削除/引用
No.4924-3 - 2016/03/17 (木) 22:05:05 - おお
>[Re:1] なぞあさんは書きました :

> これは単純に凝固点降下によって説明できますか?

凝固点降下って溶液に溶けているものの影響で凍る温度が変わることですよね、、、凍っているんですよね。。。

(無題) 削除/引用
No.4924-2 - 2016/03/17 (木) 17:07:20 - AP
昇華によって水が揮発したため、溶質が粉末状になっているんでしょう。

フリーザーでも長期保存していれば、水は昇華してフタの裏で再凝結・凍結したり、チューブの仕様によってはフタの隙間から逃げていきます。結果、底や壁に溶質が取り残されて析出・乾燥します。凍結防止のためグリセロール溶液になっている酵素などでもおこりますよ。

ですから、フリーザーで保存している試薬は単に融解するだけでなくよく混ぜてから分取します。そうじゃなければ設定より溶質濃度が高かったり薄かったり、析出して溶けてなかったり、ということになりかねません。

10 mM dNTP内に結晶?粉? 削除/引用
No.4924-1 - 2016/03/17 (木) 16:10:31 - なぞあ
実験初めて間もないものですが、PCRでdNTPがなくなったので注文すべきか上の人に聞いたら、dATP, dTTP, dGTP, dCTPの古い単品があるもんでそれを均等に混ぜたら?と言われました。各100 mMでした。

なので1:1:1:1で混ぜて25 mMを作ったのち、1.5倍量の水を加えて10 mMにしたらいいのかなと思ってますが、-20度保存の各チューブを見ると中身が当然凍っているのですが、一部チューブの壁面に粉末が出ていたりなど奇妙でした。

これは単純に凝固点降下によって説明できますか?

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