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(無題) 削除/引用 No.4895-7 - 2016/03/22 (火) 09:28:38 - si 出たばっかの論文ですが Programmable RNA Tracking in Live Cells with CRISPR/Cas9 にCas-GFPがありますね。 GFP fusionにしてもいけるみたいですね。

(無題) 削除/引用 No.4895-6 - 2016/03/04 (金) 11:51:38 - tet パッとみた感じ、plasmidはGFP (or resistant gene)-2A-Cas9ばかりなので、融合すると機能しないのかも GFP (or resistant gene)-2A-Cas9のmRNAと、ターゲットのgRNAをco-transfectionという手もある

(無題) 削除/引用 No.4895-5 - 2016/03/04 (金) 11:33:30 - ponta Tet さん GFE-fusion or Antibiotics-fusion CAS9 はいい案ですね。その場合、CAS9 の機能としては大丈夫なのでしょうか。もしペーパー等ご存知ならば是非教えていただけないでしょうか？

(無題) 削除/引用 No.4895-4 - 2016/03/04 (金) 11:16:04 - tet GFPか薬剤耐性タンパク質とCas9の融合タンパク質をつくれば？ 入ったからといってゲノムが改変されるわけではないけどね

補足 削除/引用 No.4895-3 - 2016/03/04 (金) 11:11:00 - ponta 前の方がわからなかったため補足すると、IVT とは In vitro transcribed の略です。もっと細かく言うと、精製した CAS９ と In vitro で転写した sgRNA をチューブ内で混ぜて RNP (gene-editing ribonuclear protein) を形成しそれを細胞にトランスフェクションします。これだと、ゲノムが傷つくのが最小限になるらしいです。

(無題) 削除/引用 No.4895-2 - 2016/03/04 (金) 10:51:15 - rもうえちゃくmもうもうmm もうめちゃくちゃ。 ivhを説明するべき。それが出来なければこのとぴをすぐに削除するべき。

CAS9 タンパクと IVT gRNA 削除/引用 No.4895-1 - 2016/03/04 (金) 08:41:01 - Ponta CAS9 タンパクと IVT gRNA をトランスフェクションする一過性の遺伝子編集に興味あります。この場合、遺伝子改変株を選択するマーカーは何をつかえばよいのでしょうか？GFPタンパクを CO-TRANSFECT するのが考えられますが、薬剤耐性で選択できればありがたいです。よろしくお願いします。

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