こんにちは。いつも勉強させていただいております。
この度CD4 memory T cellの増殖に関して質問がございます。
現在ヒトのCD4 memory T cellを血液からマグネティックビーズで回収し(ネガティブセレクション)、complete RPMI media、CD28/CD3ビーズ、IL2で刺激し増殖させています。
刺激後、毎日顕微鏡で細胞を観察しますと、非常に大きなコロニーを形成する細胞と、Single-cellの状態で浮遊している細胞がいます。
トータル細胞数は刺激後4日で1.2倍程度となっており、そこまで増えておりません。
細胞数があまり増えないことからCD4 memory T cell中の特定のサブセットのみが刺激操作に反応し、増殖しているのかなと考えています。
またSingle-cell状態の細胞は刺激操作に反応していないと思っています。
(コロニーから遊離している可能性も無くはないのですが)。
このように特定の細胞だけ増殖しているという結果は通常見られるものなのでしょうか?
実験操作はLife technologiesのプロトコルに沿って行っております。
どなたかお詳しい方がいらっしゃいましたらご教授お願い致します。 |
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