Bio Technical フォーラム

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ラット心筋細胞 トピック削除
No.4871-TOPIC - 2016/02/23 (火) 12:33:21 - まま
ラット新生仔から分離した心筋細胞にフェニレフリンを負荷し、心肥大を誘発しています。フェニレフリンは10-50uMで投与し、24時間後に細胞を回収、qPCRで心肥大の程度を観察しています。しかし、フェニレフリンを投与すると、数分以内に心筋細胞が全滅してしまうことが多々あります。上手く結果が得られることもありますが、失敗する時との違いがわかりません。同じような経験がある方はいらっしゃるでしょうか?原因と対策について、ご教示お願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.4871-3 - 2016/02/24 (水) 08:32:26 - まま
フェニレフリンを水(超純水)で溶いて、50mMのストックを作っています。ストックは-80℃で保存しています。実験に使用するときは、そのストックを溶解して、目的の濃度(10uM-50uM)になるように投与しています。フェニレフリン投与前は拍動も見られる心筋細胞が、投与後には細胞がしぼむように小さくなっていきます。

(無題) 削除/引用
No.4871-2 - 2016/02/23 (火) 17:05:48 - おお
どのようにフェニレフリンを細胞の培養液に添加してますか?

ラット心筋細胞 削除/引用
No.4871-1 - 2016/02/23 (火) 12:33:21 - まま
ラット新生仔から分離した心筋細胞にフェニレフリンを負荷し、心肥大を誘発しています。フェニレフリンは10-50uMで投与し、24時間後に細胞を回収、qPCRで心肥大の程度を観察しています。しかし、フェニレフリンを投与すると、数分以内に心筋細胞が全滅してしまうことが多々あります。上手く結果が得られることもありますが、失敗する時との違いがわかりません。同じような経験がある方はいらっしゃるでしょうか?原因と対策について、ご教示お願いいたします。

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