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赤色の蛍光遺伝子の選択
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No.4869-TOPIC - 2016/02/22 (月) 18:18:20 - ゲス
ある遺伝子のプロモーターの下流に赤色蛍光遺伝子を挿入した
ベクターを作製して、マウスの培養細胞に導入しようと考えてます。
しかし、うちのラボには赤色蛍光遺伝子はTdTomatoしか持っていません。
培養細胞に導入する場合、TdTomatoで何か問題があるのでしょうか?
なければいいのですが、もしその他の推奨される赤色の蛍光遺伝子が
あれば、教えてほしいです。
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No.4869-5 - 2016/02/23 (火) 00:02:19 - おお
発現リポーターに利用するならあまり半減期が長いとうまく行かないかもしれません、そういう意味では蛍光蛋白は安定性がよくあまりいいと思いませんけど、、、やるなら半減期が短いものを選ぶほうがいいでしょう。大昔ですがストラタジーンがレポーター用に半減期が短いGFPを売ってたようなきがします。
(無題)
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No.4869-4 - 2016/02/22 (月) 21:59:53 - AA
タカラのHPにクロンテックno赤色蛍光タンパクの比較をしたページが有ります。
http://catalog.takara-bio.co.jp/product/basic_info.php?catcd=B1000689&subcatcd=B1000631&unitid=U100006268
こちらをご覧になられると良いかと思います。
基本的には、分子の大きさのほかにもフォールディングにかかる時間や半減期なども注意されると良いかもしれません
(無題)
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No.4869-3 - 2016/02/22 (月) 18:34:59 - ゲス
早速のご回答ありがとうございます。
そうですよね、モノマーのmCherryがいいですよね。
クロンテックのサイトでもmCherryが推奨されていました。
目的遺伝子のプロモーター活性を赤色で見たいだけなので、
tdTomatoでもいいのならば、これをレポーターとして使おうと思います。
(無題)
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No.4869-2 - 2016/02/22 (月) 18:28:18 - 独り言
特定のタンパク質に赤色タンパク質を融合させる場合はmCherryがよく使われます。モノマーの赤色で明るい。
単に発現マーカーとして赤色タンパク質を発現させたいだけであれば、tdTomatoでもいいと思います。
赤色の蛍光遺伝子の選択
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No.4869-1 - 2016/02/22 (月) 18:18:20 - ゲス
ある遺伝子のプロモーターの下流に赤色蛍光遺伝子を挿入した
ベクターを作製して、マウスの培養細胞に導入しようと考えてます。
しかし、うちのラボには赤色蛍光遺伝子はTdTomatoしか持っていません。
培養細胞に導入する場合、TdTomatoで何か問題があるのでしょうか?
なければいいのですが、もしその他の推奨される赤色の蛍光遺伝子が
あれば、教えてほしいです。
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