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in vitro でのポリユビキチン化 トピック削除
No.4857-TOPIC - 2016/02/18 (木) 13:06:06 - ポリ
現在、in vitroでSIC1PYというタンパク質のポリユビキチン化を行っています
E1・E2・E3・SIC1PYは全て大腸菌や酵母から精製してきています
濃度や条件は論文を参考にして何度も試行しているのですが、ユビキチン化がmono・di・triまでは行ってそれより上のpolyに進みません
反応時間を長くしてみたり、酵素やタンパク質の濃度を変えてみたりしているのですが中々ポリユビキチン化されません
同じ経験をされた方、またはこの分野について詳しい方がおられましたらご教授よろしくお願いします

　
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in vitro でのポリユビキチン化 削除/引用
No.4857-1 - 2016/02/18 (木) 13:06:06 - ポリ
現在、in vitroでSIC1PYというタンパク質のポリユビキチン化を行っています
E1・E2・E3・SIC1PYは全て大腸菌や酵母から精製してきています
濃度や条件は論文を参考にして何度も試行しているのですが、ユビキチン化がmono・di・triまでは行ってそれより上のpolyに進みません
反応時間を長くしてみたり、酵素やタンパク質の濃度を変えてみたりしているのですが中々ポリユビキチン化されません
同じ経験をされた方、またはこの分野について詳しい方がおられましたらご教授よろしくお願いします
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