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(無題) 削除/引用 No.4853-4 - 2016/02/23 (火) 02:28:21 - おお あんまりいい教科書を使われているのか、ちゃんと読んでないだけなのか、、、操作方法だけしかのってないものだったら、作業には困らないでしょうけど、原理などがちゃんと書かれた本を持っておいたほうが良いかと思います。

(無題) 削除/引用 No.4853-3 - 2016/02/23 (火) 00:26:33 - ほんじょう ＞免疫染色のブロッキングについて、教科書には2次抗体が作られた動物の正常血清を用いるようにと書いてあります。これは何となく理解できるのですが、 何となく理解ってレベルだからダメ 理解していない

(無題) 削除/引用 No.4853-2 - 2016/02/17 (水) 12:51:47 - AP なぜ必要性に疑問を感じるのかのほうが疑問。 タンパク質、糖鎖、核酸、生物を構成する物質はそれぞれ吸着性を持っています。抗体もタンパク質です。 抗体に限らず、タンパク質をかければ、抗原抗体反応に依らない、非特異的な吸着は多かれ少なかれ必ずおきます。静電相互作用とか、疎水結合とか、、、、 あらかじめ、そういう非特異的な吸着をしうるところに、適当なタンパク質などの「ブロッキング剤」を吸着させることで、非特異的吸着による抗体の結合を抑えるわけです。 適当なタンパク質とは、必ずしも正常血清でなければならないわけでなく、BSAだったりカゼインだったりゼラチンだったりもしますが、使う抗体の由来生物と正常血清がいいのは、 ・抗体と同じ種類のタンパク質であるIgが含まれているので、抗体が非特異的につきやすいとことに付きやすくて、効果的にブロックできると期待できる。 ・二次抗体、つまり抗抗体抗体を使う場合、異種に対するで抗体に対する抗体はできるけれど、同種に対する抗体は（交差性も含めて）ありえないから。

免疫染色のブロッキングの必要性 削除/引用 No.4853-1 - 2016/02/17 (水) 12:27:29 - mbd いつも参考にさせていただいています。 免疫染色のブロッキングについて、教科書には2次抗体が作られた動物の正常血清を用いるようにと書いてあります。これは何となく理解できるのですが、例えばFITCなどconjugateされた抗体を利用する場合、ブロッキングは必要なのでしょうか？

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