Bio Technical フォーラム

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RNase DNA Freeの容器 トピック削除
No.4802-TOPIC - 2016/02/01 (月) 23:10:14 - たいぞう
いつもお世話になります。
最近RNAの実験をするようになり、RNA分解酵素が恐ろしくて仕方ありません。
手袋等もしょっちゅう替えて、なんとかcDNA合成にこぎつけていますが、いつもRNase Freeのチップを取り出す時にコンタミしなきゃいいけど・・・と思います。
チップは、ビニール袋に入っているので、袋の口を狭めながらガサゴソ揺らして、RNaseZap(Ambion)で拭いた机の上に落としています。
ところが、先日、RNA抽出実験の動画を見ていて、RNase Freeのチップをプラスチックらしき広口瓶から取り出しているのを見ました。瓶から蓋の内側に落としていました。
ビニール袋から小分けできればすごく便利なのに!と思ったのですが、プラスチックだったらどうやって容器をRNase DNA Freeにしているのかと思いまして・・・。
皆様の実験室ではどうなさっていますか?
瓶の内側を、DNAーOFF(タカラ)で拭いて、滅菌水で洗い流して、RNaseZap(Ambion)で拭く、という感じで大丈夫なのでしょうか?
それとも、移し替えることなど考えずに、袋からガサゴソ落とした方が汚染率は低くなるのでしょうか。
教えていただけると助かります。
 
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RNase DNA Freeの容器 解決済み 削除/引用
No.4802-4 - 2016/02/03 (水) 00:13:41 - たいぞう
おお様、しゃーれ様

お返事ありがとうございました!
過去のトピックも見ていると、RNaseZapも気休めだというご意見もあり、
気にし出すと切りがないようです・・・。
恐怖に縛られていても仕方ないので、手ごろなプラスチック容器をとりあえず市販
の核酸除去剤で拭いて、蒸留水で流し、最後の仕上げに過酸化水素で拭くことに
しました!

本当にいつもありがとうございます!!

(無題) 削除/引用
No.4802-3 - 2016/02/02 (火) 13:15:14 - しゃーれ
ディスポのディッシュではどう?
机に落とすのってなんとなく気持ち悪いし、一度に20本くらいキープできれば
ストレスも少ないのではと想像。

(無題) 削除/引用
No.4802-2 - 2016/02/02 (火) 01:05:01 - おお
ちょっと神経質になりすぎているような気がしますけど、まあ変にラフになるよりいいかもしれませんけどね。。。

ガラスの瓶で乾熱滅菌できるならそれでいいもいいかと思います。蓋が乾熱では持たないと思うなら、アルミホイルを代用するといいでしょう。

きれいに洗っていればオートクレーブでも大丈夫です。オートクレーブではRNaseは失活しないと言われていますが、Thermoのホームページにこの辺のことが書かれていたと思います。

私は3%ぐらいのH2O2を使うこともあります。H2O2は気体なので乾けば残らないので。

RNase DNA Freeの容器 削除/引用
No.4802-1 - 2016/02/01 (月) 23:10:14 - たいぞう
いつもお世話になります。
最近RNAの実験をするようになり、RNA分解酵素が恐ろしくて仕方ありません。
手袋等もしょっちゅう替えて、なんとかcDNA合成にこぎつけていますが、いつもRNase Freeのチップを取り出す時にコンタミしなきゃいいけど・・・と思います。
チップは、ビニール袋に入っているので、袋の口を狭めながらガサゴソ揺らして、RNaseZap(Ambion)で拭いた机の上に落としています。
ところが、先日、RNA抽出実験の動画を見ていて、RNase Freeのチップをプラスチックらしき広口瓶から取り出しているのを見ました。瓶から蓋の内側に落としていました。
ビニール袋から小分けできればすごく便利なのに!と思ったのですが、プラスチックだったらどうやって容器をRNase DNA Freeにしているのかと思いまして・・・。
皆様の実験室ではどうなさっていますか?
瓶の内側を、DNAーOFF(タカラ)で拭いて、滅菌水で洗い流して、RNaseZap(Ambion)で拭く、という感じで大丈夫なのでしょうか?
それとも、移し替えることなど考えずに、袋からガサゴソ落とした方が汚染率は低くなるのでしょうか。
教えていただけると助かります。

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