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C2C12細胞の分化 削除/引用 No.4795-4 - 2016/01/30 (土) 13:14:32 - 細胞初心者学生 皆様 お返事有難うございます． たいへん詳細にご回答頂き，助かりました． なるほど，時間に関しては，決まったものがあるわけではなく， あくまで自分が必要な段階を自分で見極めればよいのですね． 早速のご対応ありがとうございました． 今後共宜しくお願い致します．

(無題) 削除/引用 No.4795-3 - 2016/01/30 (土) 12:00:27 - おお 分化といっても、ファイブロブラストー＞筋肉ではなくってタイムコースをとるともっといろいろ段階がありそうだということに気が付くとおもいます。要するにあなたがみたい段階がどこで、それにかかる時間を探さないと行けないでしょう。 またC2C12といえど、各研究室で飼っているそれぞれをくらべると同じC2C12ではない可能性が高いと思ったほうがいいです。継代のちょっとした手癖、経験してきた血清のロットその他いろいろな要因で細胞はちょっとづつ変化していくものだと思ったほうがいいです。 なので、一度分化への一連の変化の中でどの段階があなたにとってベストかを考え適切なマーカーを見つけて、ご自身の手でマーカーを見ながら分化誘導後どれぐらいの時間の状態がいいか見つけることをおすすめします。分化の過程に関しては一度レビューなどを複数探して読んでみることをおすすめします。

(無題) 削除/引用 No.4795-2 - 2016/01/30 (土) 11:43:06 - まっくろん C2C12の2%HS分化誘導はかなりたくさん論文があるので、論文を探すこと自体はPubMedでもGoogle Scholarでもとても容易かと思います。それより、「何をポジティブとするか？」を決めた方がいいんじゃないでしょうか？MyogeninやMyHCなど、何か標的の因子があればそれが動く(あるいはピークを示す)ところとか。あと、分化誘導後、経時的にサンプリングして、自分の系に適したところを探すことも必要かと思います。

C2C12細胞の分化 削除/引用 No.4795-1 - 2016/01/30 (土) 09:46:07 - 細胞初心者学生 はじめまして．いつもお世話になっております． 大変初歩的な質問かもしれませんがお許し下さい． 現在，ウェスタンブロットによってC2C12細胞の分化のチェックを行おうとしております．この際のポジティブコントロールの分化の条件について困っております． 手法としては，論文でもよく見る，DMEMに2％Horse Serumを加えた，分化誘導培地を用いることを検討しておりますが，培養の日数が論文によって異なっていると思います．(72時間ほどしか見ていないものから2週間見ているものもありました．) コントロールとして，適切な分化誘導の条件を選ぶためにも，皆さんが参考にしてる論文などがあればご教授願えませんでしょうか？ なお，私は専門は機械工学でして，細胞に関してわからない部分が多く， 本文内にも不適切な表現などもあるかとは思いますが， ご容赦くださると幸いです． ご回答，宜しくお願い致します．

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