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siRNAの保存
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No.4719-TOPIC - 2016/01/06 (水) 02:12:22 - RNAi
事情により溶液状態で1年近く4C保存されていたsiRNAをもらって使っているのですが、上手く働きません。1年前は働いたようです。RNase free, 滅菌状態でも4C保存だと分解は起こるのでしょうか。今までは分注して凍結保存していたのでこうした保存状態のものははじめてで。
分かる人いたら教えて下さい。
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No.4719-4 - 2016/01/06 (水) 10:34:34 - AP
酵素は触媒であり、触媒は反応速度を早める作用をするもの、というのが定義でしたね。逆に言えば触媒がなくても反応速度が下がるだけということ。
RNAの場合は2'水酸基が近傍のリン酸ジエステル結合を求核攻撃するので、これ自体が加水分解の触媒作用を持っているとも言えます。
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No.4719-2 - 2016/01/06 (水) 02:39:31 - おお
RNase freeもどこまで厳密にそうなのか、扱っている間のコンタミは無視できるかというのをふくめて起こることは否定できないと思います。電気えいどうで調べてみてもいいかもね。分解していないなら再アニーリングをした方がいいという話もきいたことがありますけど。
siRNAの保存
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No.4719-1 - 2016/01/06 (水) 02:12:22 - RNAi
事情により溶液状態で1年近く4C保存されていたsiRNAをもらって使っているのですが、上手く働きません。1年前は働いたようです。RNase free, 滅菌状態でも4C保存だと分解は起こるのでしょうか。今までは分注して凍結保存していたのでこうした保存状態のものははじめてで。
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