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(無題) 削除/引用 No.4685-4 - 2015/12/20 (日) 22:05:24 - TOKIO 私の経験では以下の通りです。 rabbit-rabbit…proteinA-HRP mouse-mouse…Trueblot mouse 他の種…proteinA-HRP protein-HRPではbackが消えきれず、protein Aはマウスとのaffinityが低いためです。 それでもLCの辺りにうっすらバンドが出ることがありますが、実用性では問題ないです。 rabbitのTrueblotは感度が悪く、ProteinA-HRPの方が感度、シグナル共によかったです。

(無題) 削除/引用 No.4685-3 - 2015/12/20 (日) 14:33:02 - まな ナナシさん 論文を教えていただき、ありがとうございます。 そうなんですね期待通り、protein A/GはnativeなigGにのみ反応するのですね。 一度挑戦してみます。ありがとうございます。

(無題) 削除/引用 No.4685-2 - 2015/12/20 (日) 12:53:32 - ナナシ 自分でやったことはありませんが、そういう論文は出てるようですね http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC1350844/

truueblotが良いのかProtein A/G/Lか。 削除/引用 No.4685-1 - 2015/12/20 (日) 11:04:14 - まな こんにちは。私が今行き詰まっている内容に関して質問させてください。 共免疫沈降をしようと思っていますが、両抗体の種が同一なため、truueblotを使ってSDSページをしましたが、それでも重鎖、軽鎖が出てしまいました。 そこで上の方からプロテインA(/まはた-G/または-L) -HRPを検出に用いてはどうかと言われました。 サンプルはメルカプトエタノールで95℃で３分ボイルするので、還元をきちんとさせるつもりです。 還元処理したものであれば免疫沈降に用いた抗体には反応しないでしょうか？ どなたか試された方、いらっしゃいますか？その際の結果を聞かせていただけると幸いです。

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