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適当なバッファー 削除/引用 No.4651-6 - 2015/12/15 (火) 18:26:09 - ema 組織バッファーでRNAseFreeであれば何でも。 PBSを持っていましたので、使用しました。

(無題) 削除/引用 No.4651-5 - 2015/12/11 (金) 18:43:52 - おお すでに卒業されてはいますが、過去の先輩でRLTを使ってできていたこととTRIzolの値段から購入は認めてもらえませんでした。。 ema様の洗うという操作は何を使って洗浄されているのでしょうか？

RNAlater 削除/引用 No.4651-4 - 2015/12/11 (金) 10:26:20 - ema 私の操作ですが、RNAlaterは高塩濃度のｐHの低い試薬なので、しっかり取り除くもしくは1回くらい洗うをしています。 抽出を依頼され人から既に入った状態でもらった場合に、Trizol抽出で持ち込み量が多くて水層が下にきたというような事がありました。 肝臓で何度かやっていますが正常に取れています。

(無題) 削除/引用 No.4651-3 - 2015/12/11 (金) 02:49:43 - 直輝 RLTは溶解力が弱いので、組織サンプルのときはTRIzolを使った方が良いです

(無題) 削除/引用 No.4651-2 - 2015/12/11 (金) 02:00:38 - おお いきなりRLTでホモゲナイズできればそれでもいいのではないでしょうか。

Buffer RLT 削除/引用 No.4651-1 - 2015/12/10 (木) 13:14:10 - おお 動物実験初心者です。 マウスに麻酔をかけたあとに肝臓を摘出してRNAlaterにいれて研究室に持ち帰り、RNA抽出をしてRT-PCRを行う予定です。 RNA抽出にはQIAGENのRNeasy Mini Kitを使っています。 Buffer RLTに肝臓をいれてホモジナイズした際、透明になるはずの溶液が白濁してしまいます。しばらくおいておくと沈殿してくるので溶解 していないのではないかと思い、組織の量を少なくしたりしてみたのですがかわりません。そのまま抽出作業を行ってもRNAは回収できませんでした。 組織量は通常で20mg程度です。少なくしたときは10mg程度です。 この場合、何に気をつけたらいいのでしょうか。 初歩的な質問かもしれませんが詳しい方ぜひご教授お願いします。

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