Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る　|　トピック一覧　|　研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム（readのみ）

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

活性染色MP法によるバンドの色について トピック削除
No.4619-TOPIC - 2015/11/30 (月) 19:59:35 - はしもと
グルタチオンペルオキシダーゼ(GPx)をアイソザイムごとに分離し半定量するのに、Native-PAGE後、MTTとPMSによる活性染色を行っています。
基質液にGSHとH2O2を添加しています。
本来であればバックグラウンドがホルマザンの紫に、分離したGPx部分のバンドの色が抜けて透明になるはずが、透明なバンドとバックグラウンドより紫色のバンドが混在しています。
バンドの色が異なる理由について、何か意見いただければありがたいです。
　
- このトピックにメッセージを投稿する -



全3件 ( 1 〜 3 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

バンドの色が変化 削除/引用
No.4619-3 - 2015/12/02 (水) 00:18:16 - はしもと
投稿者です。

染色して1日目はバンドが紫色だったのが、2日目は色が抜けて透明（本来ほしい結果）になっていました。

さらに、約1か月前に染色したゲルのバンドは、染色当初紫と透明のバンドが混合していましたが、現在すべて透明になっています。

これはホルマザンが染色直後はバンド部分に残留していたがその後流出したと考えるべきでしょうか。
ちなみに、染色後ゲルはUPWで洗浄し、UPWに浸漬して冷蔵保管しています。

(無題) 削除/引用
No.4619-2 - 2015/12/01 (火) 01:30:06 - おお
MTTが基質になり、ホルマザンを生成させる酵素が細胞内にあります。MTTが基質になり、ホルマザンを生成させる酵素が細胞内にあります。succinate dehydrogenaseとか。

活性染色MP法によるバンドの色について 削除/引用
No.4619-1 - 2015/11/30 (月) 19:59:35 - はしもと
グルタチオンペルオキシダーゼ(GPx)をアイソザイムごとに分離し半定量するのに、Native-PAGE後、MTTとPMSによる活性染色を行っています。
基質液にGSHとH2O2を添加しています。
本来であればバックグラウンドがホルマザンの紫に、分離したGPx部分のバンドの色が抜けて透明になるはずが、透明なバンドとバックグラウンドより紫色のバンドが混在しています。
バンドの色が異なる理由について、何か意見いただければありがたいです。
全3件 ( 1 〜 3 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール  　アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます）
上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません）
解決（問題が解決した際にチェックしてください）
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 
〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。