In-Fusionはよく使います.
私の場合は制限酵素処理したベクターの完全消化を電気泳動で確認後,ゲル抽出なしに使用しています (フェノクロ抽出,エタ沈はします).
このやり方でも問題なく当たりのクローンを取れますし,切れ残りのバックグラウンドも思ったより出ないなという印象です.
また,私の場合はクローニングエンハンサーは用いておりません.
確かPCR産物をそのままIn-Fusionに持ち込むときに用いるときに加えるものだったと思いますが,ベクターもPCR産物もフェノクロ抽出とエタ沈で精製すれば問題なくクローニングできます.
効率の良しあしは別として,とにかくベクターに入ればよいのであれば,あまり質問の内容は気にしなくてもよいかと思います. |
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