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PCRで使用しているプライマーについて
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No.4573-TOPIC - 2015/11/10 (火) 07:19:58 - まめぐみん
すいません、PCR初心者です。
プライマーについて聞きたいことがあります。
現在qPCRを行う際、原液のプライマー溶液を、1×TEで10倍希釈して
(10µM)使用していて、
一度希釈した余ったプライマー溶液を-20℃で保存しているのですが、
どのくらい保存していても大丈夫なのでしょうか?
よろしくお願いします。
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No.4573-4 - 2015/11/10 (火) 13:50:55 - おお
http://www.idtdna.com/pages/docs/default-source/technical-reports/stability-guidance-external_final.pdf?sfvrsn=2
これによるとTEなどに解かして凍らせておいた場合2年ぐらいはqPCRに影響がなさそうだということです。dCqを1.5の幅でとっているのでその幅がどうかというのはありますけど。
(無題)
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No.4573-3 - 2015/11/10 (火) 10:00:11 - おお
凍結融解を繰り返さなければ数年(3, 4年)は持つんじゃないかな。
single strandはplasmid DNAのような2本鎖よりは不安定だときいたことはあります。なのでプライまーでも10年ぐらいもっているものもあるんですけど、五年ぐらい前のものを掘り出してきて使ったらだめだったという経験をしたというひともいます。
(無題)
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No.4573-2 - 2015/11/10 (火) 08:47:40 - うんと
私は一ヶ月以内に全て終わらせる実験であれば、希釈したプライマーはいちいち凍結しなおさず、4度で保存しています。
PCRで使用しているプライマーについて
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No.4573-1 - 2015/11/10 (火) 07:19:58 - まめぐみん
すいません、PCR初心者です。
プライマーについて聞きたいことがあります。
現在qPCRを行う際、原液のプライマー溶液を、1×TEで10倍希釈して
(10µM)使用していて、
一度希釈した余ったプライマー溶液を-20℃で保存しているのですが、
どのくらい保存していても大丈夫なのでしょうか?
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