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大腸菌の大量培養 トピック削除
No.4572-TOPIC - 2015/11/10 (火) 07:12:27 - 初心者
はじめまして
大変初歩的なことをお伺いしたいです。

大腸菌を1Lで培養するように言われましたが、その際にまずコロニーを3mLぐらいで培養をしてから、大腸菌が十分に増えたらそれを1Lに入れろといわれました。
そのほうが増殖が速いといわれましたが、なぜだかわかりません。

以前、似たようなことで、ものすごく小さいコロニーを3mlで長時間培養しても十分に増えずに、プラスミドの収量が悪かったです。
そのため、コロニーが十分に大きくなったのを確かめたうえで、培養するようにしています。
この方法ではプラスミドが十分に取れます。

大腸菌がある程度の細胞密度を保つ必要はまったくないような気がするのですが、このようなことはなぜ起きるのでしょうか?

もしなにかご存知の方がいましたら教えてください。
お願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.4572-3 - 2015/11/10 (火) 09:53:38 - おお
全培養をしてある程度以上の密度をたもって培養する方がいいんじゃないかとおもいます。たぶんlag phaseを作らないようにできるのだと思います。
ただ3mlから1Lはどうだろう。。。

あとエアレーションも増えやすさにかなり影響するし、大腸菌に入っているプラスミドなどの性質も増殖に影響することがあるので、3mlで遅かったというのは何か理由がありそうですけど。

>大腸菌がある程度の細胞密度を保つ必要はまったくないような気がするのですが、

>そのため、コロニーが十分に大きくなったのを確かめたうえで、培養する

上記の2つのことは相互矛盾しませんか?

(無題) 削除/引用
No.4572-2 - 2015/11/10 (火) 08:46:45 - うんと
> 大腸菌がある程度の細胞密度を保つ必要はまったくないような気がするのですが、

貴方様の勘違いです。

大腸菌の大量培養 削除/引用
No.4572-1 - 2015/11/10 (火) 07:12:27 - 初心者
はじめまして
大変初歩的なことをお伺いしたいです。

大腸菌を1Lで培養するように言われましたが、その際にまずコロニーを3mLぐらいで培養をしてから、大腸菌が十分に増えたらそれを1Lに入れろといわれました。
そのほうが増殖が速いといわれましたが、なぜだかわかりません。

以前、似たようなことで、ものすごく小さいコロニーを3mlで長時間培養しても十分に増えずに、プラスミドの収量が悪かったです。
そのため、コロニーが十分に大きくなったのを確かめたうえで、培養するようにしています。
この方法ではプラスミドが十分に取れます。

大腸菌がある程度の細胞密度を保つ必要はまったくないような気がするのですが、このようなことはなぜ起きるのでしょうか?

もしなにかご存知の方がいましたら教えてください。
お願いします。

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