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(無題) 削除/引用 No.4542-4 - 2015/10/30 (金) 16:51:26 - 弘法 グルコースを使います。 まずはきちんとマニュアルやプロトコルを読みましょう。

(無題) 削除/引用 No.4542-3 - 2015/10/30 (金) 16:09:17 - QQ 資料の添付ありがとうございました。 私が使用する、baitとpreyのプロモーターはADH1で、酵母のgenotypeにはΔgal80が含まれています。 Gal1プロモーターを使用する実験ではラフィノースとガラクトースを混合したものを使用するような記述がなされているため、自分の実験においては使用しないのではないかと考えています。 また、Gal4は構成的に必要なだけで、直接的なガラクトースの誘導やグルコースの抑制がないために、培養での炭素源はグルコースで構わないということでしょうか。 ご存知でしたら、返事をよろしくおねがいします。

(無題) 削除/引用 No.4542-2 - 2015/10/30 (金) 15:27:27 - おお bait と prayのプロモーターにもよる。またどのイーストの株を用いるかも考慮しないといけない可能性があるとおもう。 よく調べてください。 http://www.clontech.com/xxclt_ibcGetAttachment.jsp?cItemId=17602

Yeast Two Hybridの培地の組成 削除/引用 No.4542-1 - 2015/10/30 (金) 15:15:57 - QQ バイオ系で研究をしています。 酵母を使って研究をし始めました。 Yeast Two Hybrid(Y2H)という方法を用いてスクリーニングを行う予定なのですが、培地に添加する炭素源についてわかりません。 BaitおよびPrey単体が酵母にあるときは、グルコースで培養を行っています。 でも、Y2HはGal4を利用したシステムであるということから、今後BaitとPreyの両方を入れた酵母の培養は、やはりガラクトースなのでしょうか？ グルコースだとGal4が抑制されるという文献を見たので、誘導をかけるならばガラクトースにするべきなのか分からずに、困っています。 ご存知の方がいればご返事宜しくお願いします。

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