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ビーズを使った希少細胞の分離
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No.4500-TOPIC - 2015/10/16 (金) 11:23:10 -
lol
現在、ヒト末梢血中のCD34陽性細胞の分離を計画しています。末梢血中の細胞頻度が
非常に少ないので、なるべく効率的に回収したのですが、一般的にポジティブセレクションとネガティブセレクションではどちらの方が効率が良いのかを教えて頂けないでしょうか。宜しくお願いします。
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(無題)
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No.4500-5 - 2015/10/17 (土) 06:46:35 -
lol
あかね様回答ありがとうございます。やはりネガティブ→ポジティブセレクションが
良いみたいですね。先の回答者様の意見も踏まえて検討したいと思います。
(無題)
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No.4500-4 - 2015/10/16 (金) 16:58:08 - あかね
私もMACSでnegative sort後に、FACSでpositive sortを推します。
実際私はCD34をそうやって回収してます。
もし一発でということなら、lineage negative CD34+でsortすればいいのではと思います。
TER119-, CD3-, B220-, DX5-CD34 +など、、、
(無題)
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No.4500-3 - 2015/10/16 (金) 14:32:38 -
lol
回答ありがとうございます。ミルテニー製品の購入を考えていますが、
2段階での分離では時間的に厳しいので1回で分離したいと考えてみます。
Dynabeadsの方も検討してみようと思います。
効率というか
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No.4500-2 - 2015/10/16 (金) 12:01:35 - ema
私見ですが、BeadsがAutoMACSタイプかDynabeadsタイプかにもよりますが
AutoMACSタイプで細胞数にこだわるなら(少しnegaが入ってもいい)Negatinve selectionを選択しますし、品質にこだわるなら(Washとかで全体的に細胞数がさがる)Positiveを選択します。
ミルテニーのはヒト用キットですが少ない集団ですので、Nega(濃縮)→Posiをしてるみたいですね。
Dynabedsタイプなら回収液を別のエッペンでとっておけばレスキューできるかと思いPositiveを選択します。
ビーズを使った希少細胞の分離
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No.4500-1 - 2015/10/16 (金) 11:23:10 -
lol
現在、ヒト末梢血中のCD34陽性細胞の分離を計画しています。末梢血中の細胞頻度が
非常に少ないので、なるべく効率的に回収したのですが、一般的にポジティブセレクションとネガティブセレクションではどちらの方が効率が良いのかを教えて頂けないでしょうか。宜しくお願いします。
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