RNaseがどこからくるか考えたことはありますか?
おおさんが指摘していますが、正常な細胞内でRNaseが問題になるくらいactiveなら細胞は生きていけませんよ。
細胞がダメージを受けて、細胞外からRNaseが流入してくる、細胞内で厳密に制御されているRNaseが制御不能になる、ある種のシグナル伝達系で選択的?RNA分解が起こる等が考えられますので、それらが生じないような方法を検討してください。
コラゲナーゼで分散後細胞を選抜する操作で細胞がダメージを受けることやある種のシグナルが細胞内に伝わり細胞内の様子(RNAの動態も含む)が変わることは十分考えられます。そのため、選抜細胞のRNAを調べた後も、その結果が元の臓器の状態を反映しているかの検証が必要だと思われます。
なお、RNAlaterは高張液で細胞の脱水作用があると考えられますのでそれを除去すると細胞にダメージが残ると思いますが(経験はないので結果は知らない)。 |
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