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(無題) 削除/引用 No.4448-3 - 2015/10/03 (土) 22:51:39 - あqwせdrfちゅいお 上から６行目の意味するところがよくわかりません。 SDS抵抗性あるいは還元剤抵抗性でダイマーを形成して６３Kに見えてる可能性はあるかもしれないけど、まあいろいろな可能性はあるけどひとつひとつ検討するのは現実的にどうかなとおもう。てか１hrのexposeでようやく見えるとかだとこれはなんかちがうものとか量の多い別のものがたまたま見えてきたということかもしれないのであまり深入りしないで抗体を買いなおしたほうがいいかもしれないていうか自分ならそうするけど他のヒトはどうかわからない。

(無題) 削除/引用 No.4448-2 - 2015/09/30 (水) 10:30:41 - おお うまくいかなくなる原因はいろいろあると思いますので、どなたかその系で経験のある人の手技などを見せてもらいなさい。 抗体がだめになっているのかもしれないし、 検出機器の問題かもしれませんし、 lysateのところで何か間違ってるかもしれませんし、 SDSPAGEがうまくいってないのかもしれませんし、 transferがあまりよくないのかもしれませんし、 どれって指摘できませんよ。

電気泳動のバンドのシフトで。。。 削除/引用 No.4448-1 - 2015/09/30 (水) 09:05:16 - みつ 先日アクリルアミドゲル電気泳動で、ある細胞抽出サンプルを泳動しまして、その後にWBをしました。 見たいタンパクの分子量は35kDaなのですが、実際は63kDa付近にバンドが薄く蛍光検出されました。それ以外のバンドは確認できませんでした。1時間位でようやく確認できたバンドだったので、抗体が薄かったのかなと思ったのですが。。。 また今回使用した抗体は絶対に発現が確認されるものにも関わらず、どのサンプルも全くもってバンドが見えませんでした。これは私のWBの技術が低いということなのでしょうか？

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