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独り言様 削除/引用 No.4406-3 - 2015/09/09 (水) 11:56:39 - にゃん お返事ありがとうございます。 ピークは重なっていません。 ごみのようなものが出る細胞もあるのですね。 正しいピークのみ上限、下限でスレッショールドをかけたら血球計算盤の値と一致しました。 独り言様の仰るように正しいピークのみ測定することにします。 ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.4406-2 - 2015/09/08 (火) 18:54:00 - 独り言 コールターカウンターZ2は使ったことないですが、一般的なフローサイトメーターでのFSCでトリプシンではがした細胞のサイズをみると、私の経験では細胞自体のピークとそれよりあきらかに小さいピークがかなりでます。小さいのは細胞の断片のようなゴミです。 293細胞とかある程度の突起がある細胞で、そのようなことがおきるので、個人的には細胞の突起がピペッティングのストレスで断片となって、ゴミのように検出されているのだと思います。アポトーシスなど誘導しておらず細胞はスクスク育っている条件でもいつでもゴミのフラクションは大量に見られ、また同じ操作でもゴミがほとんどない細胞もあります。 正しいサイズの方のみを測定値とすればいいと思います。それとも分離できないほど２つのピークが重なってしまっているのでしょうか。

コールターカウンターでの細胞数と粒径分布測定について 削除/引用 No.4406-1 - 2015/09/08 (火) 16:30:52 - にゃん いつも参考にさせていただいております。 コールターカウンターZ2で細胞数と粒径の分布をみています。 使っている細胞はNT2細胞です。 普通なら粒径分布は単一になるように思うのですが、ピークが2つ出ます。 2つのピークは近接しており粒径が小さいほうのピークのほうが粒子数が多くなっています。 しかし、血球計算盤での細胞数計数結果と一致するのは粒径の大きいピークのみを選択した場合（スレッショールドをかけた場合）となっています。 ２つのピークをスレッショールドに入れてしまうと血球計算盤の結果よりもかなり多い細胞数となってしまいます。 このような場合は細胞分散液の作り方が悪いのでしょうか。もしくはコールターカウンターの設定が悪いのでしょうか。 お知恵をお貸しください。 よろしくお願いいたします。

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