いつもお世話になっております。
今回の疑問はPCR反応についてです。
私のところで、動物の皮や毛のサンプルからDNAを抽出し、動物の種類を鑑別しようとしています。それらのサンプルからはDNA量が少ないことやinhibitorが多いため、DNA抽出にsilicaカラムやAmiconやMicroconなどのfilterを使って、DNA抽出しました。Qubit 3.0 により、数ng〜数百ng/mLくらいDNAが収穫できました。しかし、この様にDNAを精製してもその後のPCR反応が成功したり、失敗したりします。そこで、詳しい方に聞きたいですが、Qubitから、DNA値がでますし、filterよりある程度inhibitorを除去できると思いますが、なぜ、PCR反応が失敗でしょうか?人為的なことがあろうかと思い、同じサンプルを他のPCRキットで反応させても同様な結果でした。
ご教授をお願いいたします。 |
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