Bio Technical フォーラム

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電気泳動後のゲル中のタンパク質 トピック削除
No.4367-TOPIC - 2015/08/25 (火) 16:13:09 - かな
いつもお世話になっております。

SDS-PAGEを行った後、すぐにトランスファーに移さず、30分程度ゲルをそのままに放置しておくことはタンパク質にとってはまずいことでしょうか。
 
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No.4367-9 - 2015/08/29 (土) 02:26:51 - qaswedrftgyhuio
経験では10~15%くらいのゲルの話ですがすくなくとも2~3時間は平気です。感じだとたぶんもっといけます。

(無題) 削除/引用
No.4367-8 - 2015/08/26 (水) 02:57:12 - おお
>[Re:6] かなさんは書きました :
> みなさま
>
> お答え頂き、ありがとうございます。
> 一応、バンドは検出されていました。
>
> かな


よかったですね。せっかくですので、どれくらいのゲル濃度でどれくらいの分子量のものを検出して、バンドがすぐにやったときと比べて見栄えがどうかなど情報を加えていただくと大変有用なとぴになるかとおもいました。差し支えなければよろしくお願いします。

(無題) 削除/引用
No.4367-7 - 2015/08/26 (水) 00:11:13 - おお
当たり前ですが低分子のほうが拡散に要注意です。

(無題) 削除/引用
No.4367-6 - 2015/08/25 (火) 23:20:10 - かな
みなさま

お答え頂き、ありがとうございます。
一応、バンドは検出されていました。

かな

(無題) 削除/引用
No.4367-5 - 2015/08/25 (火) 18:11:28 - 独り言
泳動層の電気止めたまま、経験的に1,2時間放置しておいてもバンドがぼやけるようなことはなかったです。

(無題) 削除/引用
No.4367-4 - 2015/08/25 (火) 18:02:40 - ppp
プロトコールによっては、トランスファーバッファー中で30分震盪することでバッファー交換を行う場合もあります。拡散するからすぐにトランスファーしないといけない、というわけではない。

(無題) 削除/引用
No.4367-3 - 2015/08/25 (火) 16:35:13 - かな
APさん

さっそく答えて頂き、ありがとうございました。

かな

(無題) 削除/引用
No.4367-2 - 2015/08/25 (火) 16:23:00 - AP
拡散が起こってバンドがぼけてきます。30分でどこまでぼけるか、どこまで許容できるかは程度の問題。

電気泳動後のゲル中のタンパク質 削除/引用
No.4367-1 - 2015/08/25 (火) 16:13:09 - かな
いつもお世話になっております。

SDS-PAGEを行った後、すぐにトランスファーに移さず、30分程度ゲルをそのままに放置しておくことはタンパク質にとってはまずいことでしょうか。

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