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(無題) 削除/引用 No.4358-5 - 2015/08/24 (月) 17:04:11 - 独り言 イソプロボックスは作ったことありませんが、１０％DMSO溶液を使っていたので、 発泡スチロールの15ml用のチューブ立てに2mlのクライオチューブを入れて、さらに同じチューブたてを逆さにかぶせて、完全にクライオチューブを発泡スチロールの中に閉じこめた状態となり、数時間ー20度に入れて固まったら、−80度に入れてました。

(無題) 削除/引用 No.4358-4 - 2015/08/24 (月) 16:34:58 - tokio イソプロボックスの使用の有無よりも保存液に何を使うかの方がクリティカルの様な気がします。 私はWAKOのバンバンカーを使っていますが、DMSOと血清を用いる方法とは比較にならない程viabilityが高いです。そのまま懸濁して−８０度に入れるだけです。

(無題) 削除/引用 No.4358-3 - 2015/08/24 (月) 03:58:12 - しろ 私もtotoさん同様、多くのストックを作りたいときは細胞バイアルを小さな発泡スチロールの箱に入れてその外側を緩衝材のようなものでぐるぐるに巻き-80度へ入れていました。イソプロボックスに入れた場合との生存率比較は検討したことはありませんが、特に問題がなかったように思います。（がん細胞、正常細胞ともに。）ストックを多く作りたくて心配でしたら、ご近所の研究室からイソプロボックスを一時的に借りるのも手だと思います。イソプロボックスでバイアルのマジックが消えてしまうのはたぶんイソプロを多く入れすぎたため、冷凍保存中に中にもれてしまっているのが原因ではないでしょうか。同様の経験があります。

(無題) 削除/引用 No.4358-2 - 2015/08/22 (土) 11:31:19 - toto ほんとにイソプロボックスのほうがviabilityは高いのですかね？以前、そう思って、市販の凍結用のイソプロボックスと、バイアルを紙箱に入れて、プチプチでくるんだのを発泡スチロール箱にいれてそのまま−80度に放り込んだのとでviabilityを比較しましたが、イソプロボックスでは、生存率が数段落ちました。以来、後者のやり方やってますが、特にsensitiveな細胞でも、iPSのような特殊なものを除けば、問題なくできています。他に比較された方、おられないですか？

イソプロボックス自作 削除/引用 No.4358-1 - 2015/08/22 (土) 08:14:40 - IB お世話になります。 以前のラボではBicellと呼ばれるコンテナを使用し、徐々に細胞ストックバイアルをフリーズダウンさせていました。 今現在のラボでは4度で20分ほど置いたのちそのまま細胞を-80度に放り込んでいますが、今後センシティブな細胞を扱うことになり、共同研究者がイソプロボックスの使用を推奨されました。 イソプロボックスを自作されておられる方、いらっしゃいませんでしょうか？ 作り方を教えていただけますと幸いです。 みた感じでは、イソプロをスポンジに湿らせたものを容器に入れて、そこへvialを入れてるような気がしましたが、マジックが消えない工夫や本当にこれであっているのかをお聞きしたいです。よろしくお願いします。

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