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(無題) 削除/引用 No.4352-3 - 2015/08/21 (金) 09:42:24 - alpha おおさんが仰るように、トリパンは非特異的にも染まります。 高濃度過ぎると染まってしまったり、初代細胞と株化細胞で染まり方が違ったりと、色々と観察像が違うと思います。

(無題) 削除/引用 No.4352-2 - 2015/08/21 (金) 02:01:57 - おお よくわからないけど全部そまってる? トレパンブルーは蛋白などの吸着するので生きた細胞も細胞表面がうっすらとはそまります。 なにか細胞が確実に死ぬ条件でどの様に染まるか確認してはどうでしょうか。

トリパンブルー染色で死細胞がおおい 削除/引用 No.4352-1 - 2015/08/20 (木) 21:43:37 - 初心者 Jurkat細胞を解凍し（90%FCS+10%DMSOで液体窒素保存）、10%FCS入りのRPMI培地で飼い始めています。 培養開始後、48時間経過しましたが、細胞は順調に増殖しており（顕微鏡にてフラスコ内にコロニー浮遊しているのを確認）、全体の細胞数も増加しているようですが、一部を取り出してトリパンブルー染色すると、ほとんどの細胞が青く染まっており、結果の乖離に悩んでおります。 （全く染まっていない透明に抜けた細胞というのが、ほとんど見当たらない） 以前培養していたときはそのようなことには気づかず、生細胞がほとんどという状態で培養継続可能でした。 増殖しているのにトレパンで染まる細胞が多い、この理由として何かアドバイスありますでしょうか？ 解凍からまだ数日しかたっていないことが原因なのでしょうか。 アドバイスありましたら、よろしくお願いいたします。

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