いつも勉強させてもらっています。
私は現在iPS細胞を作製するような実験を行っています。
エレクトロポレーション法によってマウスの繊維芽細胞にエピゾーマルベクターを導入することによって遺伝子導入しています。
その際、1回分のポレーションで使う1×10^6細胞をいくつかのwellに均等にまいているのですが、出てくるコロニー数、アルカリフォスファターゼ染色ポジティブコロニー数が毎回wellによってかなりばらついてしまいます。(2〜10倍程度)
懸濁等操作にはかなり気を使っているつもりなのですが、このようにコロニー数がばらつく原因を同じような実験をやっておられる方に指摘いただければと思います。 |
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