Bio Technical フォーラム

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ご返事 削除/引用
No.4283-4 - 2015/07/20 (月) 20:53:50 - Con
みさん、ppさん、書き込みありがとうございます。

コンピを作るのは、ベクターをDH5αにトランスフォーメーションして、ベクターを増やしたり、作ったりするのに使用したいと考えています。

やはり室温でやる必要などがあるのでしょうか?37℃で培養しOD600が0.4から0.6くらいになったらそれでいいのではないかと考えていたのですが。

(無題) 削除/引用
No.4283-3 - 2015/07/20 (月) 18:38:22 - pp
コンピを作ろうとしているなら、作る方法によっては培養温度は重要です。
単に菌体のストックをつくるわけではないと思いますが、室温でよいか37度でよいかは目的によるので、何をしたいのかを説明したほうがよいですよ。

(無題) 削除/引用
No.4283-2 - 2015/07/20 (月) 17:46:05 - み
室温なんかで撹拌したっけな?
それはさておき、容器の形状、回転数、通気性などで培養時間なんて変動するから、自分でO.D.測りながらやるのが普通だよ。

Competent Cell DH5α の作り方について 削除/引用
No.4283-1 - 2015/07/20 (月) 14:41:34 - Con
Competent Cell DH5α (ToYoBo社製)からDH5αのストックを作ろうとしています。。

プロトコールを見ると、よく、37℃で25mLくらの培地に植菌後6〜8時間振盪培養後、100mLの培地に1mLを移し室温で振盪培養のように書いてあります。

ここのプロトコールをたとえば、37℃で15時間の培養で培養液の量を300mLくらいにしたら、OD-600の値がちょうど0.4から0.6くらいになるとかいうのご存知の方がいたら教えていただけないでしょうか?

現在、共同施設の振盪培養器を使用しているため培養器の温度を変更することができません(いつも使用されているので・・・)。

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