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セルスクレーパーでコンラージ棒の代用 トピック削除
No.4276-TOPIC - 2015/07/16 (木) 18:16:44 - tora
いつもお世話になっています。

タイトルの通りくだらない質問ですが皆様のご意見をお聞きしたいです。

現在ある遺伝子の大腸菌への形質転換を行っています。
以前コンラージ棒を切らしてしまっている時に、代用品としてセルスクレーパーを用いて、IPTG,X-Galの塗布、大腸菌の播種を行いました。
するとプレートには全くコロニーが生えていませんでした。
先輩に聞いてみると、セルスクレーパーが大腸菌を傷付けたのかもしれないと言われましたが、そんなことってあるのでしょうか。
本来細胞を集める為に使用するものなので、大腸菌をひどく傷付けることはないのではないかと勝手に想像しているのですが、皆様はどう思われますか。
それともたまたまセルスクレーパーを使用した時に他の所でミスがあったのでしょうか。
くだらない質問ですが皆様のご意見をお聞きしたいです。
ちゃんとコンラージ棒を使えという意見は無しにしてもらえるとありがたいです。
 
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(無題) 削除/引用
No.4276-8 - 2015/07/17 (金) 08:56:30 - 中年
ちなみに、うちではパスツールピペットを炙って曲げたものを常用しています。

(無題) 削除/引用
No.4276-7 - 2015/07/17 (金) 08:42:18 - 中年
X-galを溶解するのに用いている溶媒(DMF?)のせいで、スクレイパーから何か溶けだしてきたのかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.4276-6 - 2015/07/17 (金) 08:20:10 - み
サブクローニング手技が下手なだけでしょう。
必ずコロニーが出るポジティブコントロールを設けて試せば良いだけ。

(無題) 削除/引用
No.4276-5 - 2015/07/17 (金) 07:25:00 - 774R
そんな殺菌作用のあるスクレーパーがあったらいいな!
(笑)(笑)(笑)(笑)

(無題) 削除/引用
No.4276-4 - 2015/07/17 (金) 00:33:40 - おお
>[Re:1] toraさんは書きました :

> 先輩に聞いてみると、セルスクレーパーが大腸菌を傷付けたのかもしれないと言われましたが、そんなことってあるのでしょうか。

ないとおもいます。

(無題) 削除/引用
No.4276-3 - 2015/07/16 (木) 19:26:29 - たていす
セルスクレーパーは、滅菌済みのものを一回だけ使用ですか?
それとも、EtOHで滅菌して、燃やしてEtOHを飛ばすのでしょうか?
燃やしたり、EtOHを乾燥させたりするのであれば、違いが出るかもしれません。

(無題) 削除/引用
No.4276-2 - 2015/07/16 (木) 18:41:10 - TS
まぁセルスクレイパーだからうまく行かないということはないと思います。

海外のラボで教わったのですが、コーンラージ棒の代わりとして、
イエローチップを少し火であぶって、ディッシュのふたの内面でいい感じにぐにゅっと曲げて使う、というのがありました。
私もときどきやりますが、特に問題なくうまくいっています。

セルスクレーパーでコンラージ棒の代用 削除/引用
No.4276-1 - 2015/07/16 (木) 18:16:44 - tora
いつもお世話になっています。

タイトルの通りくだらない質問ですが皆様のご意見をお聞きしたいです。

現在ある遺伝子の大腸菌への形質転換を行っています。
以前コンラージ棒を切らしてしまっている時に、代用品としてセルスクレーパーを用いて、IPTG,X-Galの塗布、大腸菌の播種を行いました。
するとプレートには全くコロニーが生えていませんでした。
先輩に聞いてみると、セルスクレーパーが大腸菌を傷付けたのかもしれないと言われましたが、そんなことってあるのでしょうか。
本来細胞を集める為に使用するものなので、大腸菌をひどく傷付けることはないのではないかと勝手に想像しているのですが、皆様はどう思われますか。
それともたまたまセルスクレーパーを使用した時に他の所でミスがあったのでしょうか。
くだらない質問ですが皆様のご意見をお聞きしたいです。
ちゃんとコンラージ棒を使えという意見は無しにしてもらえるとありがたいです。

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