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BrdUとDAPIの併用 トピック削除
No.4263-TOPIC - 2015/07/12 (日) 18:38:41 - かず
現在、特定の遺伝子が発現している場合の細胞増殖に関して調べている論文を読んでいるのですが、その中の実験データでBrdUとDAPIの画像データが並んで載せられているものがあります。
BrdUは、BrdUでラベルしたDNAがDNA合成期でどれだけ取り込まれているかで細胞の増殖程度が判断できるようですが、DAPIは死細胞染色データを表しているととらえて良いのでしょうか?(細胞膜透過処理をしたとは記載なかったです)


特定遺伝子が発現しているBrdUデータは細胞数が少なく、コントロールでは細胞数が多かったと示されており、この遺伝子が発現している場合のDAPIデータでは細胞数はコントロールより多かったです。
論文の中では、この遺伝子発現による細胞増殖抑制はアポトーシスではないと示した実験データがありました。
だとすれば、特定の遺伝子が発現するとアポトーシスが起こっているため細胞増殖が低下しているように見える。と考えられると思うのですが・・・。
いかがでしょうか?
 
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(無題) 削除/引用
No.4263-4 - 2015/07/13 (月) 07:39:10 - ssd
>[Re:1] かずさんは書きました :
> 論文の中では、この遺伝子発現による細胞増殖抑制はアポトーシスではないと示した実験データがありました。
> だとすれば、特定の遺伝子が発現するとアポトーシスが起こっているため細胞増殖が低下しているように見える。と考えられると思うのですが・・・。
> いかがでしょうか?

どうしてそう思うのですか?
apoptosisが起こっていないことを示すデータがあるのに、増殖の低下がapoptosisだと思う理由がわかりませんけど。

(無題) 削除/引用
No.4263-3 - 2015/07/13 (月) 03:05:10 - おお
BrdUじたいの蛍光はあってもこのような観察には使えないと思いますので、BrdUを抗体などで検出しているとおもいます。要するに免疫染色をしているので、抗体が入れる状態になっていて、もともと生きていた細胞でもこのような状態ならDAPIはDNAにアクセスできると思います。

(無題) 削除/引用
No.4263-2 - 2015/07/12 (日) 19:44:55 - AP
生細胞にBrdUを取り込ませてから、固定、抗BrdU抗体で染色すると同時にDAPIで全細胞核を対比染色しただけだとおもいますが。つまり全細胞核のうちBrdUを取り込んだものの割合がどれくらいかという話じゃないですか。

BrdUとDAPIの併用 削除/引用
No.4263-1 - 2015/07/12 (日) 18:38:41 - かず
現在、特定の遺伝子が発現している場合の細胞増殖に関して調べている論文を読んでいるのですが、その中の実験データでBrdUとDAPIの画像データが並んで載せられているものがあります。
BrdUは、BrdUでラベルしたDNAがDNA合成期でどれだけ取り込まれているかで細胞の増殖程度が判断できるようですが、DAPIは死細胞染色データを表しているととらえて良いのでしょうか?(細胞膜透過処理をしたとは記載なかったです)


特定遺伝子が発現しているBrdUデータは細胞数が少なく、コントロールでは細胞数が多かったと示されており、この遺伝子が発現している場合のDAPIデータでは細胞数はコントロールより多かったです。
論文の中では、この遺伝子発現による細胞増殖抑制はアポトーシスではないと示した実験データがありました。
だとすれば、特定の遺伝子が発現するとアポトーシスが起こっているため細胞増殖が低下しているように見える。と考えられると思うのですが・・・。
いかがでしょうか?

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