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ヒト凍結肝細胞のスフェロイド形成
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No.4246-TOPIC - 2015/07/04 (土) 20:18:25 -
大きな木
96 ウェル プレートでスフェロイド形成させたいんのですが、
コーニングの低吸着プレートではスフェロイドがうまくできませんでした。
培地はDMEM 10%FBSですが、他に均一サイズのスフェロイド形成に適した条件やプレートはありませんでしょうか?
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テラサキプレート
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No.4246-8 - 2015/07/06 (月) 16:05:46 - ema
私はテラサキプレート96穴で行ってました。
http://www.watson.co.jp/product/plate/other-plate.html
少し安いです。
十分に凝集塊となりました。
(無題)
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No.4246-7 - 2015/07/06 (月) 09:40:09 - おお
細胞の調子が問題ならhanging dropsもあまり解決方法にならないとおもいます。
(無題)
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No.4246-6 - 2015/07/06 (月) 08:08:42 -
大きな木
コメント有難うございます。
アノイキスですが、ハンギングドロップだとスフェロイド形成できるのでしょうか?
(無題)
削除/引用
No.4246-5 - 2015/07/06 (月) 07:30:29 - hep
anoikis
(無題)
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No.4246-4 - 2015/07/05 (日) 20:54:09 -
大きな木
コーニングのプレートでは、U底の底面に集まりはするのですが、塊ができず、モロモロでした。初代肝細胞の場合、スフェロイド形成には足場接着が必要なのでしょうか?
(無題)
削除/引用
No.4246-3 - 2015/07/05 (日) 10:27:59 - おお
hanging dropsをつくって培養する方法があって、たとえば96wellの蓋の部分に細胞けんだく液を微量のっけて、本体に従来のようにのっけて培養するとふたから培養液の雫が垂れ下がるようになり、細胞をふたの表面に接触させないでばいようできます。
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3197119/
いまwebでしらべるとhanging dropようの培養装置も開発されているようです。
https://3dbiomatrix.com/features/
うまくいかないというのはどの様なことが起こっているのでしょうか? 細胞がくっついてしまうというのなら上記のような方法で解決するでしょうけど、細胞が調子が悪いとかそう言うのなら培養液などの条件の検討を要するかもしれませんよ。
(無題)
削除/引用
No.4246-2 - 2015/07/05 (日) 07:23:42 - F
http://www.scivaxls.com
1枚1万円と単価は高いですが、好んで使用しています。
スフェア形成しない細胞もあるのでまずは試してみないといけません。
このプレート使用時ですが、私はmatrigelをfinalで1%となるように培地に調製してます。
スフェア形成が促されて、形も大きく丸く、きれいになります。コーニングの低接着プレートで
ワークするかは試したことがないのでわかりません。
ヒト凍結肝細胞のスフェロイド形成
削除/引用
No.4246-1 - 2015/07/04 (土) 20:18:25 -
大きな木
96 ウェル プレートでスフェロイド形成させたいんのですが、
コーニングの低吸着プレートではスフェロイドがうまくできませんでした。
培地はDMEM 10%FBSですが、他に均一サイズのスフェロイド形成に適した条件やプレートはありませんでしょうか?
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