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(無題) 削除/引用 No.4244-2 - 2015/07/04 (土) 01:22:49 - おお みなさんどのようにP1とか定義されているかわかりませんけど、たとえば細胞老化を見るときは細胞数が倍になる時点でPが1増えます。そうしないと老化のプロセスで Pの値が同じ状態を反映しませんから。 なのでたとえばいまほぼコンフルの状態で4つのdishに分けたとしてそれがほぼコンフルの状態になればPは2つすすみます。 P4まで細胞をけいだいする時期に2まいのdishに植えつぎ、一枚を凍結するなどして、P4までで実験する細胞用にとっておいてその後expandしたものを大量にすとっくしてはどうでしょうか。 まあそういうのは一度指示した方と相談してください。

初代培養細胞のP1とかP4とかについて 削除/引用 No.4244-1 - 2015/07/03 (金) 21:25:27 - お尋ね 今、胎児E18.5からmouse embryonic fibroblasts (MEFs)を樹立しました。（P0） 今は10 cm dish一枚に撒いています。 ボスから沢山増やして、-80度にストックするようにと言われました。 さて、私が参考にしている論文には「P4までのMEFを実験に用いた」と書かれてあるため、これに従いたいです。このP4というのはTrypsin/EDTAなので細胞を剥がして、それを継代（passage）して4回目ということを表していると思っています。そこでP4以前のMEFを大量に作製してストックしたいです。 質問です。 P0: 10 cm dish一枚から次にどうpassageするかです。P1で10 cm dish2枚に撒いてしまっては、すぐにコンフレントになってP2を作製せねばなりません。し、ストックできる細胞数も少なくなります。 逆にP1で10 cm dish 5枚とか10枚に撒くと、それだけ多くのフレッシュな細胞を-80度に多くストック出来る気がします。 なので、後者の方法でpassageした方がいいのかなーと思ったりしますが、みなさんのお考えはどうでしょうか？教えてください。

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