いつもお世話になっています。
今回はシークエンス解析で不可解な結果が出たので、皆様のご意見をお聞きしたいです。
TAクローニングを行い、プラスミドを抽出しシークエンス解析を行いました。
シークエンス解析を出す前にプラスミドでPCRとnestedPCRを行い、目的のバンドが得られることは確認し、シークエンス解析をしたのですが得られた配列はベクターのセルフライゲーションと思われる配列でした。
なぜこのようなことが起こるのか皆様の意見をお聞きしたいです。
あと今後シークエンス解析を出す際は、やはり制限酵素を用いたインサートの確認を行う方が良いのでしょうか。
皆様アドバイスお願いします。 |
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