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(無題) 削除/引用 No.4202-6 - 2015/06/22 (月) 22:11:50 - 小児科医師（ゆとり教育） >mmさん　プレートのご教示ありがとうございました。 結局、trypan blueで染めてみたところ、浮いている細胞は ほとんど死細胞でした。凍結保存から培養を再開したところ なので、特に問題のない結果だと思います。本日、接着した 細胞だけを残して培養液を交換しました。接着細胞は論文で 見る通りの形状をしているのでうまく培養できているようです。 ご回答いただいた皆様、誠にありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.4202-5 - 2015/06/22 (月) 08:51:04 - mm 生きてる細胞は位相差で見ると明るいのに対して死細胞は黒っぽいと言われますが、厳密に見分けるのは難しいかもしれません。 神経系の細胞は接着性が弱いので、laminin、poly-L-lysine、plu-L-ornithineなどをコートしたプレートを用いることも多いです。 また、血清のロットによってECMや増殖因子の含有量が異なるので、接着性に影響する事も考えられます。 コートしたプレートを使う事で浮遊細胞の割合を減らす事ができると思いますが、分化や形質の変化が起こる可能性もあるので、論文を調べてみて使用されているものを選べば安心でしょう。

(無題) 削除/引用 No.4202-4 - 2015/06/21 (日) 18:08:33 - 小児科医師（ゆとり教育） >おおさん コメントありがとうございました。trypan blueで染めてみます。 >サンショウウオさん 接着する細胞と浮遊する細胞は少し違うのですね。参考になりました。

(無題) 削除/引用 No.4202-3 - 2015/06/21 (日) 12:30:59 - サンショウウオ PBSで浮遊しているの洗い流して、接着したのだけ選択して継代し続けたら浮遊してるのが目立たなくなった。という経験ならJ774でならあります。

(無題) 削除/引用 No.4202-2 - 2015/06/21 (日) 11:46:24 - おお 少量を培地からとってtrypan blueなどで染めてみてはどうでしょうか。そうしているうちに認識できる感覚がつく様になるかもしれませんし、区別がつかないことがわかるかもしれません。。。

SH-SY5Y 細胞の形態について 削除/引用 No.4202-1 - 2015/06/21 (日) 07:52:20 - 小児科医師（ゆとり教育） いつもお世話になっております。人神経芽細胞腫由来のSH-SY5Y 細胞の形態について質問させていただきます。 ATCCのサイトを見るを、These cells grow as a mixture of floating and adherent cells.と記載されています。質問は、 死細胞と浮遊細胞は肉眼的に区別がつくのでしょうか？ 先日、-80度に保存してあったSH-SY5Y細胞を、10％ FBSを含む DMEMで培養を開始しました。翌日観察したところ、パラパラと 接着している細胞も見られるのですが、9割以上の細胞は浮遊 しています。死細胞なのか、生きている浮遊細胞なのか？ 細胞は遠隔地に住む先輩からドライアイス輸送にていただいた ため、身近に聞ける研究者がいません。googleで画像検索した のですが、いずれも接着細胞の写真ばかりで、浮遊細胞の ものはみつかりませんでした。 SH-SY5Yの培養にご経験のある先生がいらっしゃいましたら 上記につきご教授賜りますと幸いです。

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