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(無題) 削除/引用 No.4195-9 - 2015/06/22 (月) 11:05:28 - mon 細胞種によりますが、癌細胞株で3日培地交換なしだとアミノ酸よりグルコースの枯渇が起こりえます（DMEM-high glucoseタイプだと??）。 これが生じると細胞内のエネルギー産生系に大きな変化が起きます。 遺伝子発現にもATPが必要ですから...。

(無題) 削除/引用 No.4195-8 - 2015/06/22 (月) 08:58:25 - sa 細胞による消費と、細胞から排出されるものによって、培地の組成は培養していると変化します。 3日培養した培地から新鮮な培地に交換すると結構細胞に影響がありそうです。 培地交換が影響するなら、毎日培地交換したほうがよいかもしれませんね。

(無題) 削除/引用 No.4195-7 - 2015/06/21 (日) 12:37:17 - サンショウウオ 培地交換する時にPBS洗浄して死細胞や老廃物(あるか知らないけど)を洗い流してみるとか。。。

オーバーコンフル 削除/引用 No.4195-6 - 2015/06/20 (土) 23:28:07 - 774R 増えすぎない？

(無題) 削除/引用 No.4195-5 - 2015/06/19 (金) 14:10:25 - おお >適切な量のDOXが投与できていなかった そう言うのは実験の失敗だから、それを防ぐための工夫とか、また万が一そうなった場合確実にわかるようなノートの取り方などよくなんがんがえながら、何回か実験を繰り返してみてから、判断しなさい。

(無題) 削除/引用 No.4195-4 - 2015/06/19 (金) 14:00:08 - body Day4-7で発現が上昇しているので、栄養枯渇、DOXが上手く投与できていなかったことが理由だとは理解し難いのですが・・・。 確かにDay3の時点で培地交換を行いました。そのあとはDay5の時点で再度培地交換を行いました。Day5のサンプルでは発現が上昇していることが検出できています。 培地交換の際に適切な量のDOXが投与できていなかったために発現までに時間を要した。そのためDay3-4では発現量の低下が見られたと考えるのが自然でしょうか・・・・？

(無題) 削除/引用 No.4195-3 - 2015/06/19 (金) 13:18:39 - おお 培地成分の培養による枯渇がまず考えられます。

(無題) 削除/引用 No.4195-2 - 2015/06/19 (金) 12:49:20 - mon 単に栄養枯渇・増殖因子枯渇が原因では？

tet-onを用いた実験で 削除/引用 No.4195-1 - 2015/06/19 (金) 11:58:44 - body tet-onを用いて、培養している細胞にDOXを投与してからDay1-7までをサンプリングして目的遺伝子の発現がどのくらいかという検証を行っています。 Day1-3までは継続して発現上昇が見られますが、Day3-4では発現量が低下しており、Day4-7は再度継続して上昇しているというデータが得られました。 なぜDay3-4では発現量が低下したのか、原因がわからずです。培地交換は３日に１度行い、速やかにDOXも投与しなおしました。培地交換の際に不手際があったのではと考えたのですが、Day4以降発現量が上がっているので可能性は低いかと思います。なにかほかに原因として考えられるものはありますでしょうか？

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