質問というわけではないのですが2点ほどご意見を伺えたらと思いまして、トピックを立てました。
どうぞ宜しくお願い致します。
現在ヒトの線維芽細胞の不死化を計画中です。AddgeneよりhTERT-HA tagのレンチウイルス用プラスミドを入手しました。線維芽細胞ですので、hTERTだけで十分不死化できると考えていますが、この場合、感染細胞の全てが基本的に不死化すると考えていいでしょうか?ウイルスタイターは十分にあるのに、感染した細胞の一部しか不死化しないのか、そうでないのかが知りたいです。
もう一つは、感染させようとしている細胞はすでにenhaustedといいますが、へたっているというか、増殖がかなり遅く、典型的な線維芽細胞の形態(spindle shape?)ではなく扁平状になっています(老化?)。不死化し終えた細胞は、ただトランスフェクションの入れ物としてだけ使う予定で機能的なアッセイには使用する予定はありませんが、このような細胞でも不死化しさえすればspindle shapeな線維芽細胞らしさが再獲得されるのでしょうか? |
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