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IBMX,Indomethacineの溶解方法
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No.4092-TOPIC - 2015/05/13 (水) 18:21:46 -
yoshi
よろしくおねがいします。
細胞を脂肪へ分化するためにIBMX,insulinを購入したのですが、溶解方法がわかりません。
IBMXはSigmaによるとDMSOもしくはエタノールとのことなのですが、どちらでも細胞培養には問題ないでしょうか?また、DMSOの場合gentle warmingとのことなのですが、どのようにしたらよいのでしょうか。
またIndomethacineなのですが、粉末のまま直接DMEMに溶解しようとしても全く溶解しません。
言葉足らずでわかりにくいかもしれないのですが、教えていただければ幸いです。よろしくおねがいします。
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No.4092-7 - 2015/05/18 (月) 10:29:18 - まっくろん
IBMXですが,DMSOを加えた後,ヒートブロックやウォーターバスで加温してはどうでしょう。培養温度で短時間であれば,濃度変化も働きも特に問題ないような気もしますし。
すみません
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No.4092-6 - 2015/05/18 (月) 09:26:46 -
yoshi
間違えてタイトルだけで間違えて送信してしまいました。
皆様のコメントを参考にもう一度トライしてみようと思います。
なおgentle warmingについては、DMSOにIBMXを希釈する際に必要との指示でした。
ありがとうございました。
返信ありがとうございます。
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No.4092-5 - 2015/05/18 (月) 09:24:34 -
yoshi
(無題)
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No.4092-4 - 2015/05/13 (水) 23:11:00 - deE
IBMXを500mM in DMSOでストックして最終1000倍希釈にして培地に添加してますが、私の使っている細胞では特に毒性はみられません。
「gentle warming」がどの過程に対する指示なのか分かりませんが、MEMに添加すると一時的に少し沈殿を生じるので、それを溶かすための操作かな?
それなら室温でも数分シェイカーで揺らしていれば溶けますよ。
(無題)
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No.4092-3 - 2015/05/13 (水) 20:19:39 - おお
インシュリンはPBSにとけないかな、、、たまに溶けにくいサイトカインもあるようで、塩酸存在下でとかすとかあるようだけど、、、
(無題)
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No.4092-2 - 2015/05/13 (水) 20:15:07 - おお
哺乳動物の培養細胞などでは、めやすとしてエタノールやDMSOは約0.1%を上限として、その程度なら影響はほとんどないだろうという推測のもとで、コントロールに溶媒だけを使い実験することが多いです。一度でいいから溶媒ありなしでご自身の実験で影響がないか確認しておくといいでしょう。
IBMX,Indomethacineの溶解方法
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No.4092-1 - 2015/05/13 (水) 18:21:46 -
yoshi
よろしくおねがいします。
細胞を脂肪へ分化するためにIBMX,insulinを購入したのですが、溶解方法がわかりません。
IBMXはSigmaによるとDMSOもしくはエタノールとのことなのですが、どちらでも細胞培養には問題ないでしょうか?また、DMSOの場合gentle warmingとのことなのですが、どのようにしたらよいのでしょうか。
またIndomethacineなのですが、粉末のまま直接DMEMに溶解しようとしても全く溶解しません。
言葉足らずでわかりにくいかもしれないのですが、教えていただければ幸いです。よろしくおねがいします。
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