全4件 ( 1 〜 4 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.4071-4 - 2015/05/06 (水) 00:33:35 - protein おおさん、アドバイスありがとうございます！ 私は浮遊細胞を使っていますので、washの際は常に遠心が必要でして タンパク質を含まないバッファーだと細胞の落ちが悪いということはしばしば耳にします。 次はPBS洗浄無しでやってみます。

(無題) 削除/引用 No.4071-3 - 2015/05/05 (火) 23:01:18 - おお でも洗ってロスしているかは保証の限りではありません。収量はかわらないかも、、、

(無題) 削除/引用 No.4071-2 - 2015/05/05 (火) 22:59:45 - おお 洗わなくても大丈夫だと思います。 ディシュで飼っている細胞を、培地をすててすぐにlysis bufferをかけるとかやることもあります。 実験によっては余分なストレスがかかるので 洗わない方がいいというかたもいらっしゃると思います。

RNA抽出の前のPBS洗浄 削除/引用 No.4071-1 - 2015/05/05 (火) 22:44:50 - protein 基本的なことですが皆様の考えを聞かせてください。 QiagenなどのカラムベースのRNA抽出では、細胞の溶解の前にPBSでwashすることが作法とされています。が、この操作は実際のところどれほどcriticalなのでしょうか。 現在１００−５００個程度の細胞を短期培養しqPCRを行っていますが、 Preampをしてもシグナルが弱く、上記のような洗浄過程で細胞をロスしているのではと懸念しています。なので、ある程度培養上清を除いた後、直接lysis bufferに移せないかと思っている次第です。

全4件 ( 1 〜 4 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---