Bio Technical フォーラム

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超遠心ぺれっと トピック削除
No.4070-TOPIC - 2015/05/05 (火) 02:07:09 - おお
グリセロールなどを使わないで、デンシティーの低い状態で100000gぐらいでO/Nでえんしんすると、たとえば蛋白-RNA complexes とかで20S程度の粒子はそこに沈殿すると思いますけど、その沈殿がどの程度しっかり沈殿するのかとかご経験のあるかたがいらっしゃいましたら教えてください。
上澄みを除いて、沈殿を回収したく思いますが、沈殿が緩いと慎重にとって、もしかしたら10%ほど上澄みを残す方がいいのかとかそんなことを考えています。
ちなみに高い密度のクッションをおくのは次のステップをかんがえるとちょっと無理です。
 
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No.4070-5 - 2015/05/09 (土) 15:19:55 - おお
むだに下げられるのはくやしいのであげとこ

(無題) 削除/引用
No.4070-4 - 2015/05/05 (火) 13:01:00 - おお
あ、きっとベクターの回収ということかもしれませんね、とするとレンチとかレトロ、、、100S前後かもしれませんね。。。

(無題) 削除/引用
No.4070-3 - 2015/05/05 (火) 10:41:43 - おお
ありがとうございました。あつかったウイルスはなんでしょうか、あるいはSedimentation coefficientでどれくらいでしょうか?

100Sでもウイルスではかなり小さい部類ですよね。。。。

超遠心ペレット 削除/引用
No.4070-2 - 2015/05/05 (火) 09:18:26 - あると信じる心
ちゃんと遠心できていると思います。
上清を除く時は注意して吸引すれば大丈夫です。
ウイルスの回収では沈殿はほとんど見えませんがきちんと取れていました。

最後の2〜3mlは1000μlピペットを使って、ゆっくり取りましょう。
遠心チューブを傾けるのは沈殿がツルンとはがれる時がありますので、
あまりお勧めできません。

超遠心ぺれっと 削除/引用
No.4070-1 - 2015/05/05 (火) 02:07:09 - おお
グリセロールなどを使わないで、デンシティーの低い状態で100000gぐらいでO/Nでえんしんすると、たとえば蛋白-RNA complexes とかで20S程度の粒子はそこに沈殿すると思いますけど、その沈殿がどの程度しっかり沈殿するのかとかご経験のあるかたがいらっしゃいましたら教えてください。
上澄みを除いて、沈殿を回収したく思いますが、沈殿が緩いと慎重にとって、もしかしたら10%ほど上澄みを残す方がいいのかとかそんなことを考えています。
ちなみに高い密度のクッションをおくのは次のステップをかんがえるとちょっと無理です。

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