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(無題) 削除/引用 No.4068-4 - 2015/05/05 (火) 04:18:05 - おお >[Re:3] kaiさんは書きました : > サンプルは培養細胞をPBS中でソニケートし、その上清タンパクです。 > このサンプルを倍々希釈していき、直接タンパクをプレートに吸着させる方法にてエライザを実施しました。 > そうしましたらR^2が0.99の検量線が引けました。 それはよかったですね。そのデーターはELISAでワークするという証明になるデーターとして、ちゃんと保存しとくといいでしょう。論文投稿するときもsupplementaryであった方がいい場合もありますし。 ちょっと気になるのはノンスペも希釈するとそれにおおじてシグナルも下がると思いますので、その特異性をどう示すかですね。。。 何種類か発現量の違う細胞でWBと比べてみてもいいかもしれません。このへんはELISAを樹立したことがないので、もっと詳しい人の意見が聞ければいいですね。

エライザ用抗体と、ウエスタン用抗体の違いについて 削除/引用 No.4068-3 - 2015/05/04 (月) 21:13:59 - kai おおさん ありがとうございます。実は先ほどウエスタン用と記載がある抗体を使い、エライザを試してみたんです。 サンプルは培養細胞をPBS中でソニケートし、その上清タンパクです。 このサンプルを倍々希釈していき、直接タンパクをプレートに吸着させる方法にてエライザを実施しました。 そうしましたらR^2が0.99の検量線が引けました。 この抗体は業者はウエスタン用とうたっていますが、エライザでも使えるじゃん(検量線がちゃんと引けたため)、と考えています。 やってみないとわからないのですね。

(無題) 削除/引用 No.4068-2 - 2015/05/04 (月) 20:58:13 - おお >[Re:1] kaiさんは書きました : > エライザ用抗体と、ウエスタン用抗体の違いは何なのでしょうか。 > 抗体販売会社のデータシートをみると、適応がウエスタンだったり、エライザだったり、免疫染色だったり色々ですね。 > > ウエスタン用の抗体は、エライザでは使用不可なのでしょうか? > 使用できる場合もありますし、できない場合もあるとは思いますが、 抗体で使えるとかうたってない場合(ELISAにしてもWBにしてもIPにしてもHCにしても)、使用できるか確認していない場合もありますので(あるいは条件次第の場合もありますので)、試してみるのも手です。

エライザ用抗体と、ウエスタン用抗体の違いについて 削除/引用 No.4068-1 - 2015/05/04 (月) 18:01:27 - kai エライザ用抗体と、ウエスタン用抗体の違いは何なのでしょうか。 抗体販売会社のデータシートをみると、適応がウエスタンだったり、エライザだったり、免疫染色だったり色々ですね。 ウエスタン用の抗体は、エライザでは使用不可なのでしょうか? ご存知の方いましたらご教授お願いたします。

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