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(無題) 削除/引用 No.4004-9 - 2015/04/12 (日) 17:13:33 - 小児科医師（ゆとり教育） nnさん、貴重な情報ありがとうございます。必要な場合にはぜひ検討したいです。

(無題) 削除/引用 No.4004-8 - 2015/04/12 (日) 14:27:03 - nn LifeTechnologiesで試薬は全部揃います。 https://www.lifetechnologies.com/jp/ja/home/references/protocols/neurobiology/neurobiology-protocols/differentiating-neural-stem-cells-into-neurons-and-glial-cells.html LifeTechnologiesは高いので、他のメーカーで同等品を探せば安く済みそうです。 教えてもらいに行く事に抵抗がなければ、実際に扱っているラボで教えてもらった方がよいと思います。関東だと慶応のO先生が有名ですよね。

(無題) 削除/引用 No.4004-7 - 2015/04/12 (日) 09:43:06 - 小児科医師（ゆとり教育） おおさん、コメントありがとうございます。SH-SY5Yで試してみてうまく行かなかったらteratomaから神経誘導も検討してみます。

(無題) 削除/引用 No.4004-6 - 2015/04/12 (日) 09:41:41 - 小児科医師（ゆとり教育） nnさん 神経幹細胞を神経細胞に分化させて実験に使用するという方法もあるのですね！神経細胞とは性質が違うので候補からはずしていたのですが、幹細胞なら増殖能も問題ないので、分化させる方法さえ確立できればとても実験の目的と合致します。ただ、維持費は高いですよね。

(無題) 削除/引用 No.4004-5 - 2015/04/11 (土) 14:51:43 - おお あとteratomaから神経誘導というのもありますが、、、うまくやるとneuroblastomaよりしっかりした神経に分化してくれます。まあそれでも癌ではあります。ただteratoma由来のembryonic carcinomaからtransgenic mouseを昔は作ってたといいますから(たしか、、たぶん、、ちょとじしんがなくなってきました)、細胞によっては分化のプログラムはけっこう保存されているかもしれません。NT2/D1は神経分化させた実験もよくあったと思います。

(無題) 削除/引用 No.4004-4 - 2015/04/11 (土) 14:35:59 - nn 日本国内ならコスモバイオ、TOYOBO、LONZAなどで正常神経細胞や神経幹細胞は売っていますが、細胞自体も培地もかなり高価です。 基本的に、分化した神経細胞は増殖できないので、繰り返し実験を行いたいのであれば神経幹細胞がよいと思います。 ただし、神経幹細胞から分化誘導する方法と他の神経系細胞と分離する手法の確立が必要になります。 また、iPS細胞を扱える環境にあるなら、iPS細胞からneurosphereを経て神経細胞に分化させることも可能です。おおさんが紹介しているのはiPS細胞由来のようですね。 いずれにしても、細胞の維持費は結構かかりそうです。

(無題) 削除/引用 No.4004-3 - 2015/04/11 (土) 12:32:10 - 小児科医師（ゆとり教育） おおさん、コメントありがとうございます。ご指摘の通り、ほとんどが腫瘍細胞由来ですから、非腫瘍細胞でとなると選択肢が狭くなりそうですね。 本日、離れた場所に住んでいる研究者からSH-SY5Yならあると連絡をもらい検討しているところです。送ってもらえるようなら、まずSH-SY5Yで試してみて実験として目的を満たすかどうか観察してみようと思います。

(無題) 削除/引用 No.4004-2 - 2015/04/11 (土) 11:15:16 - おお 入手しやすく、培養がしやすい人神経細胞は、neuroblastomaから樹立したものがたいていだと思いますが、、、なので癌細胞です (SH-SY5Y etc)。 Fred Gageらが神経前駆細胞をマウスから樹立したのをきっかけに人でもためされてできるという話があったような気がしますので、それが商品化されているかもしれません。少なくともラットなどもう十年ぐらい前だとおもいますが、どこかのカタログで見たと思います。 neural stem cellsなども商品化しているようですが、neurosphereという細胞塊でして、そのなかにstem cellsがいるのですが、その周りには分化した細胞がいて、グリアなども含まれたmixtureになっています。 まあでもいろいろと商品も出回ってきているようなので、知っている人からレスがつけばいいですね。 ちょっとややこしいのはGageらも彼らが樹立した細胞はneural stem cellsといってますが、neurosphereのneural stem cellsと違います。 これとかsphereで培養してなさそうなので、Gageのやり方から改良して作ったのかもしれません。 http://www.globalstem.com/human-iPSC-derived-neural-cells 紹介しておいて無責任ですが一度内容をお確かめください。培養は簡単でないかもしれません、、、ただ培地などせっとだったり、専用培地を売ってたりするのでそんなに試行錯誤しなくてもいいかも、、、 あと、神経といってもいろいろタイプがありますが、、、(培養でとなるとあまり選択の余地がないかもしれませんけど、、、)

一般的なヒト神経培養細胞（neuron）を知りたい 削除/引用 No.4004-1 - 2015/04/11 (土) 09:56:19 - 小児科医師（ゆとり教育） いつもお世話になっております。 ウィルスベクター(AAV9)をヒト神経培養細胞に感染させ、RNA、蛋白の解析をする実験計画を立てています。今まで繊維芽細胞、HK-2細胞、JEG3細胞を使用した経験はありますが、神経培養細胞は初めてです。 目的は正常神経細胞での発現を調べることなので、がん細胞ではなく正常細胞に近いものが希望です。由来はヒトで、できれば入手しやすい一般的なヒト神経培養細胞（neuron）を探しています。周りの何人かの小児神経科医に聞いたのですが、いずれも細胞培養の経験がないか、リンパ芽球と線維芽細胞しか使ったことがないとのことで目的とする情報が得られませんでした。 お勧めの細胞株があればご教授ください。

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