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(無題) 削除/引用 No.4-3 - 2012/01/05 (木) 18:40:44 - み TSさんの質問に加えて、マウス組織とはどこの組織ですか？ ホモジナイズできていないだけとか・・・。 また、RNA抽出の御経験は問題ないくらいあるのでしょうか？ いちおう現時点での質問に対する感想は：「ZAPの混入が原因とは思えない」です。

(無題) 削除/引用 No.4-2 - 2012/01/05 (木) 17:27:35 - TS どのような方法で抽出したのでしょうか。 きれいなRNAがとれないというのはどのような評価法に基づくのでしょうか（OD比？　電気泳動？）。どの程度のグレードのRNAが欲しいのでしょう？ 冷凍庫は-80℃でしょうか。保存期間は？ RNA laterなどはお使いではないのですか。 そのあたりを御開示した方がよいとは思うのですが、 ZAPのふき残しは、抽出過程ではあまり問題にならないと思います。 一方、冷凍庫から取り出してから、抽出バッファーにホモジナイズするまでに融解してしまったのであれば、それは関係あるかもしれません。 1mm角であれば、ピンセットを液体窒素などで冷やしておかない限り、つまんだ瞬間に溶けるでしょう。 ただし、普通の手技でテキパキやれば、瞬間的に融解しても、RNAはそれなりには取れると思います。 取り扱いが悪かった心当たりがあるのでしょうか。

凍結マウス組織の取り扱い 削除/引用 No.4-1 - 2012/01/05 (木) 14:44:24 - かもめ 凍結させたマウスの組織からRNAの抽出を行いました。 セラムチューブに入った1ミリ角の組織を、RNA ZAPで拭いたピンセットを用いて取り出したところ綺麗なRNAが取れませんでした。 ZAPの拭き残しがあり、影響したのではないかと先輩に言われたのですが、 ピンセットをZAPで拭いた後にヌクレアーゼフリー水ですすいた方が良かったのでしょうか？ それとも単に私の組織の取り扱いが悪くて、組織が溶けてしまっただけでしょうか？

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