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最終糖化産物(AGEs)の免疫染色 トピック削除
No.3958-TOPIC - 2015/03/23 (月) 20:05:51 - スプーン
免疫染色初心者です。

最終糖化産物の免疫染色を行おうと思っているのですが、ポジティブコントロールとして存在が既知である組織を探しています。

基本的なことを聞いており、とても恥ずかしいのですが、どなたかご存じありませんか。また、存在が既知である組織がわからない場合、どのようにポジティブコントロールをとったらいいのでしょうか。

よろしくお願いします。
 
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最終糖化産物(AGEs)の免疫染色 解決済み 削除/引用
No.3958-6 - 2015/03/27 (金) 16:50:53 - スプーン
みなさん、ありがとうございます。
とても参考になりました。
また何かありましたら、よろしくお願いします。

(無題) 削除/引用
No.3958-5 - 2015/03/27 (金) 16:16:51 - やくも
positiveな組織はだいたい病態モデルだと思います。
作るのが面倒な場合、vitroで合成したお持ちの抗体が反応するであろうAGEs(BSA-AGEs等)を、適当な組織(肝臓など)に少量注射してその組織を
ポジコンとして使うというのはどうでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.3958-4 - 2015/03/27 (金) 03:26:57 - おお
ぐぐったら、抗体もうってそうだし、免疫染色のイメージも見つかりますし、そう言うのを調べるだけでも探せそうですが、、、

(無題) 削除/引用
No.3958-3 - 2015/03/25 (水) 23:18:43 - 名無し
最近なんか、みんなとにかくネガコン、ポジコンおけってかんじするんだが、、そうそう簡単に用意出来るものばかりとは限らないし、要は抗体の特異性がチェックできればどういう方法でもいいわけで、で、今考えたんだが、BSAにAGEをコンジュゲートしたものとか売ってないかな?無ければ作ればいいんだが。それと抗体混ぜて少し置いてから、AGE-BSAコンジュゲート+およびBSAのみ+で免疫染色して,前者でシグナルが出ないか、減弱すれば、AGEのシグナルだな、とかんがえてもよくね。てかよく知らないけどAGEっていろいろあるでしょ、もってるのは特定のAGEに対する抗体なんだよね。抗原となるAGEの構造が分からないと難しいこともあるけど。どんなもってる抗体の抗原がどんなAGEかはっきりしないならば、とりあえずPBSにBSAと高濃度グルコースと防腐剤を混ぜて1〜2ヶ月くらい37CにいれとけばあるいていどAGE化BSAできるんじゃないかな。ROSが出来るから多少BSAが分解するかもしれないけど。

(無題) 削除/引用
No.3958-2 - 2015/03/24 (火) 22:36:09 - fj
最終糖化産物ってもいろいろあるし。
どの最終糖化産物を見たいかによるでしょうけど、T1DMネズミの腎臓、肝臓、心臓、血管等みてみれば?

最終糖化産物(AGEs)の免疫染色 削除/引用
No.3958-1 - 2015/03/23 (月) 20:05:51 - スプーン
免疫染色初心者です。

最終糖化産物の免疫染色を行おうと思っているのですが、ポジティブコントロールとして存在が既知である組織を探しています。

基本的なことを聞いており、とても恥ずかしいのですが、どなたかご存じありませんか。また、存在が既知である組織がわからない場合、どのようにポジティブコントロールをとったらいいのでしょうか。

よろしくお願いします。

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