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エマルジョン内から生細胞を回収する方法
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No.3933-TOPIC - 2015/03/10 (火) 07:34:30 - エマ
いつも勉強させて頂いております。
早速ですが質問させていただきます。
現在生細胞をエマルジョン内に閉じ込め、ある操作をしています。
このエマルジョンを壊して生細胞を取り出したいのですが、エマルジョンを壊すには有機溶媒を使わなければならず、細胞も死んでしまいます。
Raindance technologiesの溶液を使えば生細胞を取り出せるのですが、組成が企業秘密なことと、機器を購入しないと溶液も買えません。
何か良い方法をご存知のかたがいらっしゃいましたらご教授していただけると幸いです。
エマルジョンはミネラルオイル、TritonX, Tweenで作成しておりますが、細胞に毒性がなければ何でも構いません。
どうぞ宜しくお願い致します。
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No.3933-6 - 2015/03/10 (火) 22:28:40 - qw
>細胞をエマルジョンに包んだ後、
は、正確には細胞を含む培養液滴をエマルジョンに包んでいて、double-emulsionと呼んでいるようだけど、あなたもそうやっているのですね?
ミネラルオイル、TritonX, Tweenのエマルジョンに細胞を直接入れると、動物細胞は生きていられませんが、double-emulsionを使っているのでしょうから、短期間であればきっと大丈夫なのでしょうね。
(無題)
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No.3933-5 - 2015/03/10 (火) 08:55:27 - エマ
ジョンさん、
有難うございます。
そのオクタノールおよびエマルジョンを試してみます。
(無題)
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No.3933-4 - 2015/03/10 (火) 08:49:41 - ジョン
1H,1H,2H,2H-Perfluoro-1-octanolを使ってる論文はいくつかあるみたいですけど、エマルジョンの組成が違うとどうなのでしょうね。
(無題)
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No.3933-3 - 2015/03/10 (火) 08:38:21 - エマ
qwさん、
前述したRaindanceの機器を用いた系で多数論文が出ております。
その論文では細胞をエマルジョンに包んだ後、数時間あるいは数日おいてからエマルジョンを壊し、細胞を回収しています。
その後細胞の生死をトリパンブルーなりPIなりで判定しています。
エマルジョンに包んでも細胞が生きていることはわかっています。
ですが先述したようにRaindanceの高価な機器を買えませんので、何か代替法がないかなと考えております。
(無題)
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No.3933-2 - 2015/03/10 (火) 08:17:35 - qw
取り出せない細胞がどうして生きていると判る??
エマルジョン内から生細胞を回収する方法
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No.3933-1 - 2015/03/10 (火) 07:34:30 - エマ
いつも勉強させて頂いております。
早速ですが質問させていただきます。
現在生細胞をエマルジョン内に閉じ込め、ある操作をしています。
このエマルジョンを壊して生細胞を取り出したいのですが、エマルジョンを壊すには有機溶媒を使わなければならず、細胞も死んでしまいます。
Raindance technologiesの溶液を使えば生細胞を取り出せるのですが、組成が企業秘密なことと、機器を購入しないと溶液も買えません。
何か良い方法をご存知のかたがいらっしゃいましたらご教授していただけると幸いです。
エマルジョンはミネラルオイル、TritonX, Tweenで作成しておりますが、細胞に毒性がなければ何でも構いません。
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