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HRPがついた1次抗体について
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No.3930-TOPIC - 2015/03/08 (日) 18:11:40 - ddd
学生のものですが、HRPを直接標識した1次抗体を保存する際に、保存場所は4℃と書いていたのに間違えて-30℃で保存してしまいました。
壊れてないかウエスタン法で確かめてみたのですが、発光試薬をかけると、バンドがある部分が茶色く染まってしまいました。
茶色にメンブレンが染まってしまった原因はなんでしょうか?
抗体の保存場所を間違えてしまったため壊れてしまったのでしょうか?
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No.3930-3 - 2015/03/08 (日) 19:13:13 - ddd
ご回答していただきありがとうございます。
抗体液の希釈倍率を間違えていました。
(無題)
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No.3930-2 - 2015/03/08 (日) 19:05:01 - mon
お使いの発光試薬のマニュアルを読んでください。
おそらくシグナルが強すぎるのだと思います。アプライ量を1/10程度に減らすか、抗体液を1/10-1/100に薄めると良いと思います。
なおHRPは結構丈夫な酵素で、1回くらいのfreeze-thawでは活性はあまり落ちないとおもいます。
HRPがついた1次抗体について
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No.3930-1 - 2015/03/08 (日) 18:11:40 - ddd
学生のものですが、HRPを直接標識した1次抗体を保存する際に、保存場所は4℃と書いていたのに間違えて-30℃で保存してしまいました。
壊れてないかウエスタン法で確かめてみたのですが、発光試薬をかけると、バンドがある部分が茶色く染まってしまいました。
茶色にメンブレンが染まってしまった原因はなんでしょうか?
抗体の保存場所を間違えてしまったため壊れてしまったのでしょうか?
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