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primary 脾細胞やリンパ節細胞の凍結保存 トピック削除
No.389-TOPIC - 2012/04/10 (火) 04:21:38 - リベロ
初歩的な質問をさせてください。

primary 脾細胞やリンパ節細胞をセルバンカーなどにより凍結保存してストックを作り、必要に応じて融解して実験に使用したいと考えています。

実験としては、主に抗原蛋白やCD3などによる刺激後、ELISPOT assayなどでサイトカインの分泌を見たり、膜抗原をFACSで染色したいと考えています。

cancer cell lineのように、凍結したprimary 脾細胞やリンパ節細胞を起こし、実験に使用することは可能でしょうか?

以上です。

よろしくお願い申し上げます。
 
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(無題) 削除/引用
No.389-4 - 2012/04/12 (木) 09:13:43 - リベロ
脾臓さま、無題様

おっしゃる通りなのですが、30週齢から40週齢の自己免疫疾患マウスの解析を自己免疫疾患発症時に行いたいと考えております。

なかなか、これらの週齢のマウスを揃えるのは難しく、また、コントロールなどもこの週齢ですとすぐには手に入らないのが実情です。

もし、可能であれば、セルバンカーで保存し、いくつかのパイロット実験のあと、更に別の解析を行っていきたいと考えております。

ヒトとマウスの細胞で、どれくらい強さが違うのかわかりませんが、ヒトで可能ならマウスでも可能だと思います。試して見たいと思います。

セルバンカーは、-80度での細胞の保存が可能だと言っていますが、セルバンカーによるprimary細胞および癌細胞ラインで保存に対して何か、良い印象、悪い印象、この実験には無理だとか、ありましたら教えていただけないでしょうか?

以上です。

よろしくお願い申し上げます。

(無題) 削除/引用
No.389-3 - 2012/04/12 (木) 06:34:31 - トラヤ
サイトカインや抗原にもよりますが、だいたい可能と思います。
だいぶ前ですがセルバンカーでストックした細胞で同じような試験をしたことがあります。
ちなみにヒトですよね?
マウスラットは毎回新しいのを取っていたので凍らせたことはありません。

脾細胞 削除/引用
No.389-2 - 2012/04/11 (水) 16:23:53 - 脾臓さん
リンパ節細胞はともかく、primaryの脾細胞なんて凍結保存するより直接取った方が早い気がするのですが。凍結の影響、細胞保存液の影響なんかを吟味するよりも、毎回採取した方が良い気がします。

primary 脾細胞やリンパ節細胞の凍結保存 削除/引用
No.389-1 - 2012/04/10 (火) 04:21:38 - リベロ
初歩的な質問をさせてください。

primary 脾細胞やリンパ節細胞をセルバンカーなどにより凍結保存してストックを作り、必要に応じて融解して実験に使用したいと考えています。

実験としては、主に抗原蛋白やCD3などによる刺激後、ELISPOT assayなどでサイトカインの分泌を見たり、膜抗原をFACSで染色したいと考えています。

cancer cell lineのように、凍結したprimary 脾細胞やリンパ節細胞を起こし、実験に使用することは可能でしょうか?

以上です。

よろしくお願い申し上げます。

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