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3T3 feed layerについて トピック削除
No.3882-TOPIC - 2015/02/23 (月) 11:58:05 - tomo
皮脂細胞の培養のため、3T3細胞による3T3 feed layerが必要になりました。
現在、私の研究施設には3T3L-1細胞はあるのですが、NIH/3T3細胞はありません。
feed layerなので、脂肪細胞に分化させず、3T3細胞にマイトマイシンC処理を行ってから、組織からとってきた皮脂腺細胞を培養する予定ですが、
このような場合、3T3L-1細胞でもfeed layerとして使用することは可能なのでしょうか?
今まで、3T3 feed layerを使用して実験したことがなく、知識不足で申し訳ございませんが、ご助言いただけますと幸いです。
お願いいたします。
 
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No.3882-4 - 2015/02/25 (水) 06:45:46 - おお
対象にする細胞が違ったりしますが、3T3-Swiss albino(ATCC CCL-92)つかったり、NIH 3T3つかったり、あるいは3T3とだけかいてなにもかいてなかったり(これはたぶんラボでembryoから3T3の方法でとったかのうせいがある)してますね。

もしご自身で3T3L-1をつかって、評価ができるのであればやってみたらいいんじゃないでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.3882-3 - 2015/02/23 (月) 16:04:00 - mon
ES細胞用のFeederで使われるSTO細胞もマウス線維芽細胞株ですので、あれば代用できそうですが...

(無題) 削除/引用
No.3882-2 - 2015/02/23 (月) 16:01:35 - mon
経験者ではないので、参考程度に思っていただきたいのですが、
"3T3 feed layer"というのは、本当にNIH3T3を利用するのでしょうか?
"3T3"の意味は、3日ごとに3倍に希釈して培養した(して得た?)線維芽細胞(株?)という意味だったと思います。有名ドコロでは、NIH3T3, Balb3T3, Swiss3T3という細胞株があります。NIH3T3はfocusを作りやすい(がん化しやすい)性質があります。
また、皮脂細胞の支持用でしたら、新生児(成体?)皮膚からとった線維芽細胞でも良いような気がします。
皮膚片を70%EtOHで消毒し、PBS中でカミソリ等で塊がなくなるまで細片化にしてDMEM+10%FBS(+抗生剤:fungizon+getacin等)で培養するとワサワサと増殖してきます。皮膚片から酵素処理で調整する方法もあります。
これが面倒だからNIH3T3を使ったのかな?

3T3 feed layerについて 削除/引用
No.3882-1 - 2015/02/23 (月) 11:58:05 - tomo
皮脂細胞の培養のため、3T3細胞による3T3 feed layerが必要になりました。
現在、私の研究施設には3T3L-1細胞はあるのですが、NIH/3T3細胞はありません。
feed layerなので、脂肪細胞に分化させず、3T3細胞にマイトマイシンC処理を行ってから、組織からとってきた皮脂腺細胞を培養する予定ですが、
このような場合、3T3L-1細胞でもfeed layerとして使用することは可能なのでしょうか?
今まで、3T3 feed layerを使用して実験したことがなく、知識不足で申し訳ございませんが、ご助言いただけますと幸いです。
お願いいたします。

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